骨髓增殖性腫瘤（MPN）是一類血液系統(tǒng)惡性疾病，主要表現(xiàn)為血細(xì)胞過度增殖，常伴有脾臟腫大、血栓形成和出血傾向，常見類型包括真性紅細(xì)胞增多癥（PV）、原發(fā)性血小板增多癥（ET）和原發(fā)性骨髓纖維化（MF）。JAK2*V617F突變是MPN中最常見的驅(qū)動(dòng)基因突變，約95%的PV患者和50%~60%的ET及MF患者攜帶該突變^[1]。該突變位于JAK2基因編碼的酪氨酸激酶的JH2假激酶域，導(dǎo)致酪氨酸激酶活性異常增強(qiáng)，進(jìn)而引發(fā)異常的造血細(xì)胞增殖和骨髓纖維化。本次推出的JAK2*V617F小鼠模型再現(xiàn)了人類MPN的多種病理特征，是MPN研究的理想工具。
 

圖1 JAK2*V617F突變是PV、ET和MF三種主要MPN中最常見的遺傳致病因素^[1]

骨髓增殖性腫瘤（MPN）的分類
MPN是一種慢性血液疾病，發(fā)病率為每年0.5-2/10萬，特征是一種或多種成熟的髓系血細(xì)胞過量產(chǎn)生^[2]。其臨床表現(xiàn)包括脾臟腫大、血栓形成及出血，約5%的患者可能進(jìn)展為急性髓系白血�。ˋML）。根據(jù)是否存在費(fèi)城染色體（Ph）易位，MPN可分為Ph陽性的慢性髓系白血�。–ML）和Ph陰性MPN，包括真性紅細(xì)胞增多癥（PV）、原發(fā)性血小板增多癥（ET）和原發(fā)性骨髓纖維化（MF）。PV的特征為紅細(xì)胞增多和全髓增生，伴隨中性粒細(xì)胞增多癥和/或血小板增多癥^[2-3]。ET則表現(xiàn)為單純的血小板增多癥，而MF為晚期MPN，伴有骨髓膠原沉積，通常伴隨髓系增生，患者可能出現(xiàn)外周血細(xì)胞減少、白細(xì)胞和紅細(xì)胞增多癥、脾腫大及全身癥狀。Ph陰性MPN與遺傳相關(guān)，其中大多數(shù)患者攜帶JAK2*V617F突變。該突變是由JAK2基因第14號(hào)外顯子1849位點(diǎn)的G到T單核苷酸替換（c.1849G>T）引起，導(dǎo)致編碼JAK2蛋白第617位氨基酸由纈氨酸（V）替換為苯丙氨酸（F）^[3-4]。
 

圖2 骨髓增生性腫瘤（MPN）的分類^[5]

JAK2*V617F突變在MPN中的作用
Janus激酶2（JAK2）在正常造血過程中起著關(guān)鍵作用，參與多種細(xì)胞因子（如促紅細(xì)胞生成素、血小板生成素、粒細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素和干擾素）信號(hào)傳導(dǎo)，激活STAT蛋白，促進(jìn)血細(xì)胞的增殖和分化^[6-7]。JAK2對(duì)于紅細(xì)胞生成、巨核細(xì)胞生成及粒細(xì)胞生成至關(guān)重要，確保各種血細(xì)胞譜系的正確發(fā)育和維持。JAK2*V617F是人類MPN中最常見的致病突變，在50%～60%的ET和PMF患者中檢出，在PV患者中檢出率高于95%。JAK2*V617F突變引發(fā)的構(gòu)象變化增強(qiáng)了JAK2的催化活性，使其處于持續(xù)激活狀態(tài)，導(dǎo)致其不再依賴細(xì)胞因子配體的結(jié)合即可激活下游信號(hào)通路。這種異常激活促進(jìn)了紅細(xì)胞、血小板和粒細(xì)胞的過度生成，從而導(dǎo)致造血異常，形成了典型的MPN疾病癥狀，如血栓形成和脾臟腫大^[6-7]。此外，JAK2*V617F突變可導(dǎo)致JAK-STAT、MAPK和PI3K/AKT等信號(hào)通路的失調(diào)，進(jìn)一步推動(dòng)造血細(xì)胞的異常增殖和分化。該突變常與其他基因突變（如MPL或CALR）共同存在，加速疾病進(jìn)展^[7-8]。
 

圖3 JAK2在正常造血中的功能及JAK2*V617F變體導(dǎo)致MPN的機(jī)制^[8]

賽業(yè)生物自研JAK2*V617F小鼠模型
為促進(jìn)MPN研究，賽業(yè)生物自主研發(fā)了多款JAK2*V617F小鼠模型，包括Jak2基因原位突變的Jak2*V617F小鼠模型（產(chǎn)品編號(hào)：C001564），該模型通過引入與人類JAK2*V617F同源的突變構(gòu)建。此外，還開發(fā)了在Cre重組酶誘導(dǎo)后表達(dá)攜帶V617F突變?nèi)祟怞AK2基因的人源化小鼠模型（表型驗(yàn)證階段）。以下是Jak2*V617F小鼠的主要表型。

多譜系造血異常增生
與野生型小鼠相比，Jak2*V617F小鼠的紅系、粒系及巨核系造血均表現(xiàn)出顯著異常增生，血常規(guī)檢測(cè)顯示其紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、白細(xì)胞數(shù)量（WBC）及血小板數(shù)量（PLT）顯著升高。
 

圖4 野生型（WT）小鼠和Jak2*V617F小鼠的血常規(guī)檢測(cè)（雄性，10周齡）*
*注：該品系純合致死，本說明書中Jak2*V617F小鼠的驗(yàn)證數(shù)據(jù)均從雜合小鼠中獲得。

脾臟異常腫大
解剖顯示，Jak2*V617F小鼠的脾臟顯著增大，重量明顯增加。

圖5 野生型（WT）小鼠和Jak2*V617F小鼠的脾臟外觀和重量對(duì)比（雄性，10周齡）

多項(xiàng)脾臟組織病理變化
組織學(xué)檢測(cè)顯示，與野生型小鼠相比，Jak2*V617F小鼠的脾臟明顯腫脹，結(jié)構(gòu)破壞，表現(xiàn)為髓系細(xì)胞增生及巨核細(xì)胞顯著增生，同時(shí)伴隨髓外造血和脾血竇充血。

圖6 野生型（WT）小鼠和Jak2*V617F小鼠脾臟H&E染色檢測(cè)結(jié)果對(duì)比（10周齡）

總  結(jié)
Jak2*V617F小鼠（產(chǎn)品編號(hào)：C001564）攜帶人類JAK2*V617F同源突變，表現(xiàn)出脾臟腫大、三系（紅系、粒系和巨核系）造血異常增生以及髓外造血和脾血竇充血等骨髓增殖性腫瘤（MPN）典型表型，是研究真性紅細(xì)胞增多癥（PV）、原發(fā)性血小板增多癥（ET）和骨髓纖維化（PMF）等疾病機(jī)制及藥物開發(fā)的理想模型。

此外，賽業(yè)生物還提供多種血液疾病和腫瘤研究領(lǐng)域的遺傳性、誘導(dǎo)性或移植模型，以滿足科研人員在不同領(lǐng)域的研究需求。

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