應激是機體對不協(xié)調狀態(tài)或環(huán)境穩(wěn)定受到威脅時所做出的反應。一般伴有神經(jīng)、內分泌、免疫和行為的變化來完成身體對應激的應答[1]。導致實驗大小鼠應激的原因有很多,如運輸、飼養(yǎng)環(huán)境變化、實驗操作等。今天,就讓小賽帶大家就實驗大小鼠的運輸應激展開討論!
1 導致實驗大小鼠運輸應激的主要因素
(1)運輸時間長短:運輸時間的增加可能會增加應激的累積效應。
(2)不同輸運方式:如汽車陸運車廂內空氣不流通、航空運輸需要在無法控溫的停機坪進行裝卸。
(3)運輸過程環(huán)境變化:如高溫、噪聲、振動、通風不良、運輸籠盒中動物密度大等。
(4)動物自身原因:如孕鼠、老齡鼠、已實驗造模的鼠等。
2 實驗大小鼠運輸應激的常見表現(xiàn)
(1)體重減輕
舉例1:短途運輸后的Wistar大鼠體重迅速下降,體重丟失率隨著運輸時間的延長呈增大趨勢(見圖1)[2]。
舉例2:作者以676只3-9周的大小鼠為研究對象,在溫控運輸車內運輸約24h,大、小鼠平均體重分別下降3.71%和0.9%。不同品系小鼠體重變化不同,C57BL/6小鼠變化最明顯(平均下降4.69%),而ICR小鼠僅下降0.5%[3]。
(2)行為變化
舉例:如異常興奮/翻轉/轉圈
(3)大小鼠過熱流涎
舉例:大小鼠汗腺不發(fā)達,高溫高濕環(huán)境下會出現(xiàn)唾液打濕嘴邊毛發(fā)的現(xiàn)象。圖中3只小鼠精神狀態(tài)較差,嘴部周圍毛發(fā)潮濕,明顯是小鼠過熱導致了流涎。
(4)動物死亡
舉例:航空運輸時,為防止籠盒的通風濾膜被刮破,通常要求在籠盒上下分別加珍珠棉,此時籠盒主要通過兩側濾膜進行通風。下圖中,為防止小鼠逃逸,在運輸籠盒外還額外加了一層鐵絲網(wǎng),導致運輸籠盒內通風不良,最終接收時整籠小鼠已死亡。
除了以上能直接觀察到的表現(xiàn),還有一些不易觀察的指標:
(5)生理參數(shù)(如心率、呼吸頻率、血壓、生理生化指標等)發(fā)生改變
舉例:經(jīng)歷1.5h短途運輸后的BALB/c和ICR小鼠的血糖、外周白細胞總數(shù)、血清皮質酮、白介素2和β-內啡肽等指標均出現(xiàn)下降,在常規(guī)飼養(yǎng)條件下自然恢復至少需要72h[4]。
(6)組織臟器出現(xiàn)病理損傷
舉例:相關報道指出運輸應激能導致小鼠小腸(十二指腸、空腸和回腸)[5]、肺臟[6]及免疫器官(胸腺、淋巴結和脾臟)[7]等組織臟器出現(xiàn)不同程度的病理損傷。
(7)影響小鼠胚胎發(fā)育
舉例:作者對14只孕中期(懷孕8~10 d)的小鼠進行約15h的長途運輸,結果顯示于對照組相比,運輸應激組的活胎率下降和死胎率增加[8]。
3 預防大小鼠運輸應激&加快恢復的措施
(1)運輸前對大小鼠進行全面的臨床觀察,確保動物健康。
(2)根據(jù)不同動物和不同運輸方式選用合適的運輸籠盒,若是汽車運送小鼠,可選用紙箱、類紙箱;若是大鼠發(fā)貨或者航空運送小鼠,則需要鐵絲籠+塑料盒配套使用。鐵絲籠使用前仔細檢查是否有凸出的倒刺,避免動物受傷。
(3)在運輸籠盒中鋪上足量的墊料、添加適量飼料和補水果凍,可根據(jù)需要添加環(huán)境豐富物,如紙條、窩料、紅房子等。
(4)盡可能避免極端天氣運輸實驗動物。若在高溫天氣運輸大小鼠,盡量選擇全程控溫的動物運輸專用車或晚上的航班進行運輸,同時降低運輸籠盒中的動物密度,并盡可能多的添加冰袋降溫。
(5)運輸過程中,確保運輸籠盒被妥善放置,盡量避免動物摔落、或因通風不良等意外的發(fā)生。
(6)動物到目的地后,盡快安排接收。若無法馬上接收,則需要先通過觀察窗確認動物狀態(tài),若動物狀態(tài)較好可先將其暫放在安靜且有空調的區(qū)域。
(7)動物接收時,可將原運輸籠盒中的環(huán)境豐富物部分轉移至飼養(yǎng)籠盒中,減少動物因環(huán)境變化引起的應激。不同籠盒/籠格來源的大小鼠,盡量不做并籠飼養(yǎng),避免出現(xiàn)打架的情況。
(8)對運輸后的大小鼠進行適應性飼養(yǎng):如經(jīng)歷短途運輸(1.5h以內)的實驗大鼠至少恢復3天[2]。若經(jīng)歷長途運輸,則應適當延長適應期,一般為5-7天。
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參考文獻:
[1]周小江,邵青,張新創(chuàng).觀察分析不同環(huán)境因素對小鼠應激反應的作用[J].微生物學免疫學進展, 2013(02):33-36.
[2]楊斐.短途運輸應激對實驗大鼠和小鼠的影響及干預研究[D].復旦大學,2008.
[3]Lee S , Nam H , Kim J ,et al.Body Weight Changes of Laboratory Animals during Transportation[J].Asian Australasian Journal of Animal Sciences, 2012, 25(2).
[4]胡櫻,楊斐.小鼠短途運輸應激及其營養(yǎng)干預的研究[J].實驗動物科學, 2012, 29(3):5.
[5]溫宇婷,劉犇,章志濤,等.運輸應激對小鼠腸道的病理損傷及Bcl-2和Bax表達的影響[J].中國畜牧雜志, 2020, 56(5):6.
[6]劉犇.運輸應激對小鼠肺臟顯微和超微結構及熱休克蛋白表達的影響[J].中國畜牧雜志, 2018, 54(9):5.
[7]胡威,鄭路程,易金鑫,等.運輸應激對小鼠免疫器官結構及熱休克蛋白表達的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學學報(自然科學版), 2021(005):047.
[8]李小娟.長途運輸應激對孕中期小鼠胚胎發(fā)育的影響[J].中國畜牧雜志, 2019, 55(10):6.