在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中，基因編輯技術(shù)的選擇對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和效率至關(guān)重要�，F(xiàn)在常用的CRISPR/Cas核酸酶技術(shù)獲得基因編輯小鼠，從打靶載體構(gòu)建——受精卵顯微注射——獲得F0小鼠——獲得F1雜合子小鼠——獲得F2純合子小鼠，周期往往需要9-12個(gè)月，其中從F0到F2純合子小鼠的周期約6個(gè)月。在科學(xué)研究領(lǐng)域，時(shí)間往往意味著競(jìng)爭(zhēng)力，高效的實(shí)驗(yàn)技術(shù)和流程是科研成功的關(guān)鍵因素。

F0代純合子小鼠的安全風(fēng)險(xiǎn)

相較于傳統(tǒng)的ES打靶技術(shù)，CRISPR/Cas核酸酶介導(dǎo)的基因編輯小鼠無(wú)需經(jīng)歷ES細(xì)胞電轉(zhuǎn)和篩選，直接將打靶載體注射到受精卵可獲得陽(yáng)性Founder鼠（F0）。但F0代小鼠具有較高的嵌合比例，因?yàn)楹怂崦讣夹g(shù)在受精卵階段進(jìn)行基因編輯，常常發(fā)生在受精卵的1細(xì)胞、2細(xì)胞甚至4細(xì)胞期，基因編輯也存在隨機(jī)性。這導(dǎo)致不同F(xiàn)0代小鼠之間的基因型不一致，且同一只F0代小鼠也可能有多種基因型嵌合。

雖然調(diào)整注射濃度可能會(huì)得到少量所謂的純合子F0代小鼠，但直接用于實(shí)驗(yàn)的話穩(wěn)定性較差，難以提供一致的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，且可提供的小鼠數(shù)量有限，因此仍然需要至少2代繁育。

新一代ES基因編輯技術(shù)TurboKnockout^®

賽業(yè)生物在傳統(tǒng)ES打靶技術(shù)的基礎(chǔ)上，研發(fā)出了升級(jí)版的TurboKnockout^®基因編輯技術(shù)，利用優(yōu)化的純合ES克隆打靶體系，可篩選基因敲除、敲入、點(diǎn)突變的純合ES細(xì)胞，該技術(shù)結(jié)合了囊胚前注射和四倍體補(bǔ)償技術(shù)進(jìn)行顯微注射，周期快至3個(gè)月，可大批量獲得基因一致的純合子小鼠。

TurboKnockout^®技術(shù)優(yōu)勢(shì)

1.編輯類型多樣化：可進(jìn)行基因敲除、敲入、點(diǎn)突變或人源化等多種項(xiàng)目類型的基因修飾；

2.QC體系多樣化：細(xì)胞階段除了可進(jìn)行除常規(guī)PCR鑒定外，還可以通過(guò)多種手段質(zhì)檢（QC）ES克隆打靶的準(zhǔn)確性，包括染色體核型鑒定、Southern Blot鑒定、qPCR鑒定、FACS鑒定等表達(dá)檢測(cè)；

3.F0基因型穩(wěn)定：結(jié)合賽業(yè)生物專利：TurboKnock顯微注射技術(shù)和四倍體補(bǔ)償技術(shù)，保障交付的所有F0代小鼠的基因型一致，基因修飾準(zhǔn)確、效果穩(wěn)定；

4.品系選擇靈活：賽業(yè)生物可提供C57BL/6NCya、C57BL/6JCya、BALB/cAnCya、129S2/SvPasCya等多品系選擇。