上周三，賽業(yè)生物腫瘤藥效部研發(fā)科學(xué)家朱金娥為大家主講「原位移植和轉(zhuǎn)移性腫瘤模型的構(gòu)建及應(yīng)用」線上課程，以下為本次直播常見問題匯總與解答。

FAQ:
1.如何用MC38小鼠建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型？
2.皮下成瘤實驗可以用普通小鼠做嗎？
3.原位移植腫瘤均一性的影響因素？
4.原位移植的成功率受什么影響？
5.原位移植和轉(zhuǎn)移性腫瘤模型的相關(guān)應(yīng)用場景？
6.可以介紹一下食管癌相關(guān)的原位癌嗎？
 

Q.如何用MC38小鼠建立結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型？
肝轉(zhuǎn)移腫瘤轉(zhuǎn)移模型模擬臨床中腫瘤切除術(shù)后癌細胞回流入門靜脈至肝臟血道播散而發(fā)生肝轉(zhuǎn)移的過程。

下面的案例是用脾臟注射的手術(shù)方法構(gòu)建的C57BL/6小鼠MC38-luc結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移模型。
 

MC38 -Luc小鼠結(jié)腸癌細胞脾臟注射的肝轉(zhuǎn)移腫瘤轉(zhuǎn)移模型

1.細胞接種量及稀釋：每只C57BL/6小鼠注射50μL含有1×10⁶個MC38 -Luc細胞的細胞懸液。

2.脾臟器官較薄，需沿著脾臟平行進針，防止針口戳穿脾臟，脾臟中血管豐富，注射后需多按壓一段時間，防止血液外滲造成小鼠大量失血而死亡，或者注射到脾臟的腫瘤細胞外滲。注射結(jié)束后，結(jié)扎脾臟血管，最后摘除脾臟。

Q.皮下成瘤實驗可以用普通小鼠做嗎？
A .需要根據(jù)腫瘤源來選取小鼠，人源的腫瘤細胞和腫瘤組織塊都需要用免疫缺陷小鼠進行皮下移植模型構(gòu)建。鼠源細胞需要用相同背景鼠進行模型構(gòu)建。

Q.原位移植腫瘤均一性的影響因素？
A .有以下幾個影響因素：細胞活性，細胞懸液均一度，注射體積的均一性，熒光信號均一性。

Q.原位移植的成功率受什么影響？
A .影響因素：麻醉風(fēng)險，位點手術(shù)風(fēng)險，技術(shù)能力，人工誤差，細胞特性等不同程度地影響原位移植的成功率。

Q.原位移植和轉(zhuǎn)移性腫瘤模型的相關(guān)應(yīng)用場景？
A.
1.研究腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移的機制。
2.篩選和評價抗腫瘤藥物的藥效。

Q.可以介紹一下食管癌相關(guān)的原位癌嗎？

Kyse150-luc人食管癌細胞下食道食管癌原位模型:
1. 細胞接種量及稀釋：每只C-NKG小鼠注射10μL含有0.5×10⁶個Kyse150-luc細胞的細胞懸液（用PBS和基質(zhì)膠混合的重懸液） 。

2. 接種在腹腔胃連接處的下食道漿膜層內(nèi)接種細胞。

3. 下食道漿膜層在肌肉作用下容易將未凝固的細胞團液體擠出漿膜層滑進腹腔，需要特殊用血管夾夾住食道，等待基質(zhì)膠凝固。

4. 建模成功率在80%。需要增加富余量20%-30%左右。

5. 此次建模使用C-NKG小鼠，可以使用缺陷小鼠類型： BALB/C nude；NOD/SCID；C-NKG。