COVID-19相關(guān)的心功能障礙是引起患者死亡的主要危險(xiǎn)因素之一。有研究報(bào)道，20-28%的COVID-19患者會(huì)出現(xiàn)不同程度的心功能障礙和心臟損傷。IL-18是IL-1家族的促炎細(xì)胞因子，作為非活性前體合成，由Caspase 1加工成活性形式后釋放。內(nèi)源性IL-18已被證明會(huì)導(dǎo)致心肌缺血后的收縮功能障礙，而過量的IL-18可介導(dǎo)心臟炎癥、纖維化和室性心動(dòng)過速。然而，IL-18在COVID-19相關(guān)的心功能障礙的調(diào)控和作用尚不清楚。

2023年3月9日，呼吸疾病國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室湯海洋教授團(tuán)隊(duì)在Signal Transduction and Targeted Therapy雜志在線發(fā)表了題為“SARS-CoV-2 Spike Protein Induces IL-18-mediated Cardiopulmonary Inflammation Via Reduced Mitophagy”的研究論文。該研究揭示了SARS-CoV-2誘發(fā)心功能障礙的機(jī)制，闡明了IL-18在COVID-19相關(guān)的心功能障礙的作用，為緩解心臟損傷提供了理論基礎(chǔ)和新的治療靶點(diǎn)。
 

圖片來源：《Signal Transduction and Targeted Therapy》

研究材料
在這項(xiàng)研究中，研究人員使用了hACE2人源化小鼠（賽業(yè)產(chǎn)品編號(hào)：C001191）、SARS-CoV-2 Spike蛋白、人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞、人心微血管內(nèi)皮細(xì)胞。

研究方法
細(xì)胞因子篩選、免疫熒光、經(jīng)胸超聲心動(dòng)圖、心電圖、Masson染色、免疫印跡、DHE染色等。

技術(shù)路線

研究結(jié)果
首先，以賽業(yè)提供的人源化ACE2小鼠（hACE2）為研究對(duì)象，利用SARS-CoV-2 Spike蛋白經(jīng)氣管插管刺激小鼠肺部建立COVID-19動(dòng)物模型。與IgG對(duì)照組相比，Spike蛋白處理組的心臟組織中IL-18和炎性小體NLRP3表達(dá)增加，NF-κB信號(hào)通路被激活，心肌出現(xiàn)膠原沉積，并且心律失常、左心室舒張功能障礙風(fēng)險(xiǎn)增加。
 

Spike蛋白引起hACE2-KI小鼠心臟IL-18表達(dá)、纖維化和心臟功能障礙的結(jié)果^[1]

為了驗(yàn)證IL-18在心臟損傷中的直接作用，研究者利用IL-18的誘餌受體IL-18BP注射COVID-19動(dòng)物模型，發(fā)現(xiàn)IL-18BP可以抑制心臟組織中NF-κB激活，改善心肌膠原沉積和左心室舒張功能。
 

IL-18BP可減少經(jīng)Spike蛋白處理的hACE2-KI小鼠的纖維化，并改善其功能^[1]

眾所周知，線粒體自噬是清除損傷線粒體的重要途徑，其缺乏會(huì)導(dǎo)致功能障礙的線粒體積累，進(jìn)一步釋放線粒體ROS，從而驅(qū)動(dòng)炎性小體激活導(dǎo)致IL-18釋放。為了探究線粒體自噬在COVID-19動(dòng)物模型IL-18活化中的作用，研究者利用線粒體自噬誘導(dǎo)劑UA和靶向線粒體ROS清除劑MitoQ進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明在hACE2小鼠心肺組織中，UA能夠誘導(dǎo)線粒體自噬，并通過減少Spike蛋白誘導(dǎo)的ROS產(chǎn)生，抑制IL-18表達(dá)。同樣地，MitoQ處理后也抑制了IL-18表達(dá)。
 

刺突蛋白通過減少線粒體吞噬和增加線粒體ROS的產(chǎn)生來誘導(dǎo)IL-18的表達(dá)^[1]

研究者在體外實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步驗(yàn)證了線粒體自噬在IL-18活化中的作用。通過透射電子顯微鏡和免疫印跡實(shí)驗(yàn)顯示，在人心血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺血管內(nèi)皮細(xì)胞中，Spike蛋白同樣能夠誘導(dǎo)IL-18和線粒體ROS產(chǎn)生，抑制線粒體自噬的發(fā)生。CCCP和MitoQ刺激均可減少IL-18的表達(dá)。此外，IL-18BP可以抑制Spike蛋白誘導(dǎo)的血管通透性增加。
 

刺突蛋白通過破壞線粒體吞噬來誘導(dǎo)IL-18表達(dá)，導(dǎo)致EC通透性^[1]

研究結(jié)論

SARS-CoV-2信號(hào)通路、線粒體自噬抑制、IL-18激活及心臟損傷之間的關(guān)系示意圖^[1]

該研究表明線粒體自噬缺乏和炎癥小體激活之間的聯(lián)系在COVID-19發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，并提示IL-18和線粒體自噬是潛在的治療靶點(diǎn)。

原文檢索：
[1] Liang S#, Bao C#, Yang Z, Liu S, Sun Y, Cao W, Wang T, Schwantes-An TH, Choy JS, Naidu S, Luo A, Yin W, Black SM, Wang J, Ran P, Desai AA*, Tang H*. SARS-CoV-2 spike protein induces IL-18-mediated cardiopulmonary inflammation via reduced mitophagy. Signal Transduct Target Ther, 2023 Mar 9;8(1):108.