——即蛋白質(zhì)（多肽）分子量的分析技術(shù)服務(wù)

基質(zhì)輔助激光解吸飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI）其基本原理為用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而電離過程中將質(zhì)子轉(zhuǎn)移到生物分子，而使生物分子電離的過程。它是一種軟電離技術(shù)，適用于混合物及生物大分子的測定。MALDI-TOF-MS具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高及分辨率高等特點(diǎn)，為生命科學(xué)等領(lǐng)域提供一種強(qiáng)有力的分析測試手段，并正扮演著越來越重要的作用。

“MALDI-TOF分子量分析，是蛋白質(zhì)藥物樣品理化分析的起點(diǎn)之一”

技術(shù)指標(biāo)

●  樣品要求：

含鹽量：揮發(fā)性無機(jī)鹽<20mM，不揮發(fā)性無機(jī)鹽<5mM；

樣品蛋白質(zhì)總含量>50pmol，純度>90%；

樣品應(yīng)盡量保持其純度，不要添加任何保護(hù)劑或其它物質(zhì)。

●  4800 MALDI-TOF/TOF技術(shù)特性：

激光器：ND : YAG，波長355nm，頻率200HZ；

檢測模式：正離子和負(fù)離子模式；

離子飛行管：線性（Linear）模式=3750px，反射（Reflector）模式=7500px。

●  多肽蛋白質(zhì)樣品分析：

多肽樣品測試分辨率可以達(dá)到18000以上，小蛋白質(zhì)樣品測試分辨率可以達(dá)到10000以上，大蛋白質(zhì)樣品測試分辨率可以達(dá)到5000以上。

案例分析

蛋白質(zhì)類質(zhì)譜分子量測定

(1) 樣品信息：抗體樣品，理論分子量為140,000Da

結(jié)果圖譜：

抗體類蛋白質(zhì)樣品的MALDI-TOF分子量測定圖譜

(2) 樣品信息：PEG修飾樣品，理論分子量為4300Da

Q&A

         ■ 根據(jù)蛋白質(zhì)樣品分子量大小不同選擇不同的基質(zhì)：

         ■ Mr<10KDa，α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid (CHCA)；

         ■ Mr>10KDa，Sinapinic Acid (SA)；

         ■ 部分糖蛋白質(zhì)樣品測試選擇基質(zhì)為：Super DHB。

         ■ MALDI-TOF測定蛋白質(zhì)樣品分子量較為簡便快捷、通量高，且測試結(jié)果為單電荷無需再進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，但對于大分子量蛋白質(zhì)樣品，只能獲取樣品平均分子量。LC-MS測定分子量較為繁瑣復(fù)雜、通量較低，且測試結(jié)果為多電荷，一般需去卷積處理，對于大蛋白可獲取較準(zhǔn)確分子量信息。