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DNA Marker-核酸分子標簽原理解析

瀏覽次數(shù):249 發(fā)布日期:2025-3-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責任自負
DNA Marker(DNA標記物)是一種用于核酸電泳的分子量標準工具,通過已知長度的DNA片段幫助研究人員估計樣品DNA的大小、濃度及電泳遷移特性。以下是其核心信息:

一、定義與作用
  1. 基本定義
    DNA Marker由特定分子量的雙鏈DNA片段組成(如100bp、500bp、1kb等),混合含染料的上樣緩沖液,用于電泳中作為分子量參照。
    • 廣義:包括可遺傳的DNA序列或蛋白質(zhì)標記。
    • 狹義:特指反映基因組差異的特異性DNA片段。
  2. 核心作用
    • 分子量估算:通過對比Marker條帶與樣品條帶的位置,粗略判斷目標DNA的大小。
    • 濃度檢測:利用Marker中高濃度條帶(如750bp)的亮度,輔助估算樣品濃度。
    • 電泳條件優(yōu)化:根據(jù)目標片段大小選擇凝膠濃度(如大片段用低濃度瓊脂糖,小片段用高濃度)。
 
二、類型與規(guī)格
  1. 常見類型
    • 預染Marker:含RedView、SYBR Green等染料,可直接電泳觀察。
    • 非預染Marker:需后續(xù)染色,靈敏度更高。
    • 梯度Marker:覆蓋廣泛分子量范圍(如1000bp、2000bp),適合多目標分析。
  2. 規(guī)格示例
    • 1000bp:含50bp、100bp至1000bp的條帶,適用于常規(guī)PCR產(chǎn)物分析。
    • 12000bp:覆蓋12000bp以上大分子DNA,用于質(zhì)粒完整性檢測。
 
三、選擇標準
  1. 目標片段匹配
    • 選擇Marker中與目標片段大小相鄰的密集條帶,以提高估算精度。
    • 例如:檢測500bp片段時,優(yōu)先選擇含400bp、600bp條帶的Marker。
  2. 凝膠濃度適配
    • 大片段(>1kb):使用0.8%-1.0%瓊脂糖+1xTAE緩沖液。
    • 小片段(<500bp):使用1.5%-2.0%瓊脂糖+0.5xTBE緩沖液。
  3. 染料類型
    • RedView:低毒性,可直接紫外觀察,適合常規(guī)實驗。
    • SYBR Green I:靈敏度高,但穩(wěn)定性較差,需避免長時間電泳。
 
四、應用場景
  1. 分子生物學實驗
    • PCR產(chǎn)物分析、質(zhì)粒構(gòu)建驗證。
    • 基因組DNA提取質(zhì)量檢測。
  2. 醫(yī)學與臨床檢測
    • 病原體核酸檢測(如新冠病毒)中評估擴增效率。
    • 遺傳病篩查中檢測基因突變。
  3. 工業(yè)與科研
    • 基因組作圖、物種親緣關(guān)系分析。
    • 腫瘤標志物檢測中的基因表達分析。
 
五、使用注意事項
  1. 保存條件
    • 常規(guī)Marker(含Loading Buffer):室溫可穩(wěn)定3個月,長期保存需-20℃。
    • 預染Marker:避免反復凍融,建議分裝后使用。
  2. 常見問題解決
    • 條帶模糊:檢查DNA降解或電泳電壓過高。
    • 遷移異常:確認樣品是否含高鹽或蛋白污染,調(diào)整電泳條件。
    • Marker丟失:縮短電泳時間(如溴酚藍遷移至凝膠2/3處停止)。
 
六、市場代表產(chǎn)品
  • 達原辰光DNA Marker:覆蓋50bp-12000bp,條帶清晰,適合各種應用。
  • 諾唯贊DL2000:覆蓋100bp-2000bp,適合常規(guī)PCR
來源:深圳達遠辰光科技有限公司
聯(lián)系電話:0755-86727654
E-mail:marketing@longlightech.com

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