溴化乙錠(EB)為何被逐漸淘汰
瀏覽次數(shù):201 發(fā)布日期:2025-3-26
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實(shí)驗(yàn)室在做瓊脂糖核酸電泳實(shí)驗(yàn)時(shí)使用的經(jīng)典染色劑是溴化乙錠(EB),使用的成本較低,但是為什么被逐漸替代了呢?這是由于EB的強(qiáng)致癌性,實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物難以處理,而替代EB的核酸染料在安全性、實(shí)驗(yàn)效率及環(huán)保性等方面具有顯著優(yōu)勢(shì)。
一、安全性提升
- 低/無毒性
替代品如達(dá)遠(yuǎn)辰光RedView、GelRed、GelGreen、SYBR Safe等通過分子結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)(大分子量、油性)或?qū)嶒?yàn)證明(艾姆斯氏試驗(yàn))確認(rèn)無致癌性,避免EB的強(qiáng)誘變性風(fēng)險(xiǎn)。例如,GelRed的廢棄物可直接倒入下水道,無需特殊處理。
- 操作防護(hù)簡(jiǎn)化
低毒染料(如SYBR Safe)無需嚴(yán)格通風(fēng)櫥操作,減少實(shí)驗(yàn)人員接觸風(fēng)險(xiǎn)。
二、靈敏度與分辨率優(yōu)化
- 高靈敏度檢測(cè)
- SYBR Gold:檢測(cè)限低至20pg DNA,靈敏度是EB的100倍。
- GelRed:電泳后染色靈敏度與EB相當(dāng),且對(duì)DNA遷移影響更小。
- 多片段兼容性
部分染料(如EvaGreen)可穩(wěn)定檢測(cè)從200bp到10kb的DNA片段,優(yōu)于EB對(duì)大片段的分離效果。
三、實(shí)驗(yàn)流程便捷性
- 無需脫色步驟
電泳后染色染料(如GelRed)直接觀察,省去EB染色后的脫色流程,縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
- 設(shè)備兼容性
替代品光譜特性與EB接近(如312nm激發(fā)),無需更換成像系統(tǒng)即可使用現(xiàn)有設(shè)備。
四、環(huán)保與經(jīng)濟(jì)性
- 廢棄物處理簡(jiǎn)化
部分染料(如達(dá)遠(yuǎn)辰光RedView、GelRed、GelGreen)通過環(huán)保認(rèn)證,可直接按普通垃圾處理,降低實(shí)驗(yàn)室污染風(fēng)險(xiǎn)。
- 長(zhǎng)期使用成本低
盡管單價(jià)高于EB,但無需額外防護(hù)裝備(如手套、通風(fēng)柜),綜合成本更具優(yōu)勢(shì)。
五、特殊場(chǎng)景優(yōu)勢(shì)
- 下游實(shí)驗(yàn)兼容性
GelRed染色后的DNA可直接用于膠回收,而EB染色的DNA需脫色處理。
- 抗干擾能力
SYBR Safe對(duì)Taq酶等常用分子生物學(xué)酶無抑制作用,適合qPCR驗(yàn)證等實(shí)驗(yàn)。
總結(jié)
替代EB的核酸染料通過
安全性升級(jí)(如達(dá)遠(yuǎn)辰光RedView、GelRed、SYBR Safe)、
靈敏度提升(如SYBR Gold)及
操作簡(jiǎn)化(如無需脫色)等特性,成為現(xiàn)代分子實(shí)驗(yàn)的主流選擇。