賽多君@你
這一期非同反響的直播回顧
我們已經(jīng)準備好了！
 
主講嘉賓
夏忠武
賽多利斯上游產(chǎn)品應(yīng)用專家
 
主要內(nèi)容
 
■ 目前常見增強培養(yǎng)工藝及其特點介紹
■ 灌流工藝控制主要考量點分析
■ 前沿穩(wěn)健，經(jīng)濟的灌流培養(yǎng)工藝控制策略
Q1
請問有什么方案可緩解ATF柱體的堵塞情況？
 
答：對于緩解ATF柱堵塞，可嘗試以下方法：
1.維持較高細胞活力。
2. 通過bleed控制細胞密度在合適水平。
3. 通過濃縮補料的方式降低換液速率。
 
Q2
灌流培養(yǎng)工藝蛋白質(zhì)量與搖瓶工藝蛋白質(zhì)量不一致如唾液酸等，從哪些方面入手解決呢？
 
答：搖瓶培養(yǎng)因pH等參數(shù)均與反應(yīng)器有較大區(qū)別，導致?lián)u瓶中目標產(chǎn)物質(zhì)量與反應(yīng)器上有一定差別。傳統(tǒng)方法一般在搖瓶階段主要關(guān)注點在目標產(chǎn)物產(chǎn)量，在反應(yīng)器中做工藝優(yōu)化時通過相關(guān)工藝手段調(diào)控產(chǎn)物質(zhì)量。也可以采用Ambr15等高通量反應(yīng)器代替搖瓶，因pH等參數(shù)均可控，可獲得與反應(yīng)器相當質(zhì)量的目標產(chǎn)物。
 
Q3
灌流培養(yǎng)如何控制一定的細胞密度？
 
答：傳統(tǒng)方案可定期取樣離線測培養(yǎng)體系中細胞密度，根據(jù)離線測得的值計算需要抽出細胞的量及需要補充培養(yǎng)基的量。但該方法受限于取樣頻率，可能會給培養(yǎng)體系帶來較大波動。
 
較為前沿的方法是整合在線活細胞監(jiān)測探頭，該探頭與細胞bleed泵及補料泵做反饋控制來調(diào)節(jié)細胞密度。該方法控制比較穩(wěn)定。
 
Q4
消泡劑大概應(yīng)該控制在多少，不會對下游影響，加了消泡劑D0會下降比較厲害，這是為什么？
 
答：在培養(yǎng)過程中，消泡劑盡量少加，一般控制在100PPM以內(nèi)。具體加多少會對下游產(chǎn)生明顯影響因培養(yǎng)基等不同也存在差異。
 
在培養(yǎng)過程中，泡沫的存在，能延長氣體與液體接觸時間，同時能增大氣體與液體接觸面積，從而對DO的維持有促進作用。消泡劑的加入會消除這些促進作用，故而加消泡劑后會看到DO有一個明顯下降。
 
 
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