賽多君@你
這一期非同反響的直播回顧
我們已經(jīng)準(zhǔn)備好了！
 
主講嘉賓
夏忠武
賽多利斯上游產(chǎn)品應(yīng)用專(zhuān)家
 
主要內(nèi)容
 
■ 目前常見(jiàn)增強(qiáng)培養(yǎng)工藝及其特點(diǎn)介紹
■ 灌流工藝控制主要考量點(diǎn)分析
■ 前沿穩(wěn)健，經(jīng)濟(jì)的灌流培養(yǎng)工藝控制策略
Q1
請(qǐng)問(wèn)有什么方案可緩解ATF柱體的堵塞情況？
 
答：對(duì)于緩解ATF柱堵塞，可嘗試以下方法：
1.維持較高細(xì)胞活力。
2. 通過(guò)bleed控制細(xì)胞密度在合適水平。
3. 通過(guò)濃縮補(bǔ)料的方式降低換液速率。
 
Q2
灌流培養(yǎng)工藝蛋白質(zhì)量與搖瓶工藝蛋白質(zhì)量不一致如唾液酸等，從哪些方面入手解決呢？
 
答：搖瓶培養(yǎng)因pH等參數(shù)均與反應(yīng)器有較大區(qū)別，導(dǎo)致?lián)u瓶中目標(biāo)產(chǎn)物質(zhì)量與反應(yīng)器上有一定差別。傳統(tǒng)方法一般在搖瓶階段主要關(guān)注點(diǎn)在目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量，在反應(yīng)器中做工藝優(yōu)化時(shí)通過(guò)相關(guān)工藝手段調(diào)控產(chǎn)物質(zhì)量。也可以采用Ambr15等高通量反應(yīng)器代替搖瓶，因pH等參數(shù)均可控，可獲得與反應(yīng)器相當(dāng)質(zhì)量的目標(biāo)產(chǎn)物。
 
Q3
灌流培養(yǎng)如何控制一定的細(xì)胞密度？
 
答：傳統(tǒng)方案可定期取樣離線(xiàn)測(cè)培養(yǎng)體系中細(xì)胞密度，根據(jù)離線(xiàn)測(cè)得的值計(jì)算需要抽出細(xì)胞的量及需要補(bǔ)充培養(yǎng)基的量。但該方法受限于取樣頻率，可能會(huì)給培養(yǎng)體系帶來(lái)較大波動(dòng)。
 
較為前沿的方法是整合在線(xiàn)活細(xì)胞監(jiān)測(cè)探頭，該探頭與細(xì)胞bleed泵及補(bǔ)料泵做反饋控制來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞密度。該方法控制比較穩(wěn)定。
 
Q4
消泡劑大概應(yīng)該控制在多少，不會(huì)對(duì)下游影響，加了消泡劑D0會(huì)下降比較厲害，這是為什么？
 
答：在培養(yǎng)過(guò)程中，消泡劑盡量少加，一般控制在100PPM以?xún)?nèi)。具體加多少會(huì)對(duì)下游產(chǎn)生明顯影響因培養(yǎng)基等不同也存在差異。
 
在培養(yǎng)過(guò)程中，泡沫的存在，能延長(zhǎng)氣體與液體接觸時(shí)間，同時(shí)能增大氣體與液體接觸面積，從而對(duì)DO的維持有促進(jìn)作用。消泡劑的加入會(huì)消除這些促進(jìn)作用，故而加消泡劑后會(huì)看到DO有一個(gè)明顯下降。
 
 
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