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激光全息細(xì)胞成像及分析系統(tǒng)應(yīng)用于乳腺癌的遷移運(yùn)動分析

瀏覽次數(shù):3521 發(fā)布日期:2017-4-1  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

近年來,我國乳腺癌的發(fā)病率呈持續(xù)增高的趨勢,在某些發(fā)達(dá)城市,乳腺癌在女性惡性腫瘤中已位居首位,根據(jù)雌激素受體的ER的類型是呈現(xiàn)激素非依賴性和依賴性,研究ER對乳腺癌的發(fā)病機(jī)制,臨床治療和預(yù)后判斷,有著重要的意義。

ER是乳腺癌重要的生物學(xué)標(biāo)志物,在乳腺的發(fā)育生長過程中受體內(nèi)雌激素和孕激素的調(diào)控,ER是乳腺細(xì)胞中的雌激素受體,癌癥發(fā)生時,對于陽性ER的患者可以通過內(nèi)分泌的治療達(dá)到70-80%的效果,而對于陰性ER患者的治療效果還不到10%,表明陰性ER患者已經(jīng)完全脫離激素的調(diào)控。本研究中,主要對陰性ER乳腺癌細(xì)胞侵入淋巴細(xì)胞探究ERα對乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移過程中的相關(guān)關(guān)系,

實驗材料:

以MCF-7乳腺癌細(xì)胞株為實驗材料,使用基因編輯技術(shù)處理后的Cas9-ERα,基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑MG6001處理的后的Cas9-ERα+ERα,以及 Cas9-vinculin,使用瑞典的HoloMonitor M4進(jìn)行拍攝細(xì)胞的運(yùn)動和遷移,觀察4小時,每2min拍攝一次。對比不同實驗組的細(xì)胞遷移運(yùn)動情況。

 

實驗結(jié)果,對比于對照組發(fā)現(xiàn)Cas9-ERα的細(xì)胞遷移性明顯增高,并分別捕捉到細(xì)胞變形過程中的五種不同形態(tài),(文章補(bǔ)充材料中1-5movie)。并且在Cas9-ERa+MG6001該實驗組中金屬蛋白酶抑制劑并沒有能抑制細(xì)胞缺少ERα后的高侵襲性。并分析了五種不同形態(tài)的細(xì)胞百分比。Cas9-vinculin的細(xì)胞遷移及細(xì)胞運(yùn)動速率同樣明顯高于對照組,同時也觀察到可細(xì)胞變形過程中的五種不同形態(tài),(文章補(bǔ)充材料中6-10movie)。綜合文章數(shù)據(jù)表明了在乳腺癌細(xì)胞中,ERα的缺失會導(dǎo)致黏著斑蛋白(Vinculin)的表達(dá)量下降會直接導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的肌球蛋白輕鏈p-MLC的增加,從而導(dǎo)致細(xì)胞的侵襲性增加。

HoloMonitor M4 非標(biāo)記,活細(xì)胞成像及分析系統(tǒng),實時追蹤細(xì)胞的運(yùn)動過程及分析細(xì)胞運(yùn)動軌跡和運(yùn)動速率,實時高效地提供給科研工作者更多數(shù)據(jù)及分析結(jié)果

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