鏈霉親和素的主要作用與核心優(yōu)勢(shì)
瀏覽次數(shù):165 發(fā)布日期:2025-4-9
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鏈霉親和素(Streptavidin)是一種從鏈霉菌(Streptomyces avidinii)中提取的蛋白質(zhì),因其與生物素(Biotin)的超高親和力結(jié)合而被廣泛應(yīng)用于生物技術(shù)領(lǐng)域。鏈霉親和素憑借其超高親和力、低背景、多功能性,成為生物素相關(guān)技術(shù)的“黃金標(biāo)準(zhǔn)”,尤其在需要高靈敏度或復(fù)雜體系(如單分子檢測(cè)、活體成像)的研究中不可或缺。
將Hela細(xì)胞與抗微管蛋白的鼠抗體以及生物素標(biāo)記的抗鼠 IgG 的山羊抗體一起孵育,隨后加入得克薩斯紅®-鏈霉親和素偶聯(lián)物(紅色)。細(xì)胞核用 Hoechst 33342 染色(藍(lán)色,貨號(hào) 17530)。
一、主要作用
1.生物素結(jié)合與信號(hào)放大
鏈霉親和素能特異性結(jié)合生物素,形成幾乎不可逆的復(fù)合物
應(yīng)用場(chǎng)景:
檢測(cè)技術(shù):ELISA、Western blot、免疫熒光中,通過(guò)生物素標(biāo)記的抗體與鏈霉親和素偶聯(lián)的酶/熒光染料結(jié)合,放大檢測(cè)信號(hào)。
2.分子固定
將生物素標(biāo)記的DNA、蛋白質(zhì)固定在鏈霉親和素包被的載體(如磁珠、芯片)上。
3.親和純化
通過(guò)生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)純化目標(biāo)分子(如生物素標(biāo)記的蛋白質(zhì)、核酸),例如在Pull-down實(shí)驗(yàn)或CRISPR基因編輯中捕獲特定DNA片段。
4.納米技術(shù)與診斷
用于構(gòu)建生物傳感器、納米材料自組裝,或診斷試劑盒中作為信號(hào)放大模塊(如化學(xué)發(fā)光檢測(cè))。
二、核心優(yōu)勢(shì)
1.超高親和力
生物素結(jié)合力強(qiáng)于抗體-抗原相互作用,確保實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和靈敏度。
2.低非特異性結(jié)合
鏈霉親和素為中性蛋白(不帶強(qiáng)電荷),而親和素(Avidin)因帶正電荷易與細(xì)胞膜等負(fù)電物質(zhì)結(jié)合,導(dǎo)致高背景。鏈霉親和素的低背景特性使其更適合高精度實(shí)驗(yàn)。
3.穩(wěn)定性強(qiáng)
耐高溫(70–80°C)、抗變性劑(如SDS、尿素),可在苛刻條件下使用。
4.四價(jià)結(jié)合能力
四聚體結(jié)構(gòu)允許同時(shí)結(jié)合4個(gè)生物素分子,增強(qiáng)信號(hào)放大(如多酶復(fù)合物標(biāo)記)。
5.低免疫原性與毒性
鏈霉親和素?zé)o糖基化,而親和素(來(lái)自蛋清)可能引發(fā)免疫反應(yīng),因此鏈霉親和素更適合體內(nèi)實(shí)驗(yàn)或臨床診斷。
6.靈活的功能化
易與熒光染料、酶(HRP、AP)、磁珠等偶聯(lián),形成多功能工具復(fù)合物。
三 、儲(chǔ)存方式
儲(chǔ)存條件:收到后,將凍干粉末儲(chǔ)存在<-15℃,并避免光照和潮濕。 準(zhǔn)備使用時(shí),將含有0.1%牛血清白蛋白的ddH2O加入小瓶中,得到1mg / mL儲(chǔ)備液。當(dāng)在2mM疊氮化鈉存在下儲(chǔ)存并且在4℃下避光時(shí),該重構(gòu)溶液保持穩(wěn)定兩個(gè)月而沒(méi)有顯著變化。對(duì)于更長(zhǎng)時(shí)間的儲(chǔ)存,重構(gòu)溶液可以分成單次使用的等分試樣,或者加入等體積的溶液。不等分的甘油(終濃度為50%),并將溶液儲(chǔ)存在-20℃(避光)。該產(chǎn)品在-20℃下穩(wěn)定1年。
注:對(duì)于所有RPE,APC和PerCP重建的綴合物將它們儲(chǔ)存在2-6℃(不要冷凍)。