常用細(xì)胞培養(yǎng)包被試劑種類和使用方法及注意事項(xiàng)
什么是包被細(xì)胞培養(yǎng)瓶試劑？
包被試劑是一種用于處理培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿表面的化學(xué)物質(zhì)，能夠模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展和增殖。通過包被處理，培養(yǎng)表面可以更好地支持細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能表達(dá)。
本文將為您詳細(xì)介紹幾種常用的包被試劑及其特點(diǎn)，并分享包被操作的注意事項(xiàng)，助您輕松提升細(xì)胞培養(yǎng)效果！
常見的包被試劑種類和使用方法
01明膠（Gelatin）CSP132
常用于包被細(xì)胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿，以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁和增殖，具有良好的生物相容性和細(xì)胞黏附性。
適用細(xì)胞：胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。
特點(diǎn)：價(jià)格低廉，易于使用，能夠提供良好的細(xì)胞附著支持。
使用范圍：常用于包被細(xì)胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿，以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁和增殖，具有良好的生物相容性和細(xì)胞黏附性。
使用濃度：1-20mg/ml 即1mg/ml-20mg/ml
包被體積：通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準(zhǔn)，通常為 T-25瓶2.5ml, T-75瓶7.5ml
包被條件：37°C 孵育≥2小時(shí)，或 4°C 過夜。
接種細(xì)胞：使用前吸除多余明膠溶液，pbs洗1-2次后可以接種細(xì)胞。
02多聚賴氨酸(PLL) CSP073
相對(duì)分子量為 70,000～300,000 的 PLL 可作為細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)基質(zhì)，能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附和貼壁，是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的細(xì)胞粘附劑。
適用細(xì)胞：神經(jīng)元細(xì)胞、原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等。
特點(diǎn)：通過靜電作用增強(qiáng)細(xì)胞附著，適合難以貼壁的細(xì)胞。
常用濃度：0.01% 至 0.1% (w/v)，即 0.1mg/ml 至 1mg/ml。
包被條件：37°C 孵育≥2小時(shí)，或 4°C 過夜。通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準(zhǔn)，使用前吸除多余溶液，用無(wú)菌 PBS 沖洗 1-2 次。
03重組人纖連蛋白（FN）CSP044
是一種重要的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，具有多種生物學(xué)功能。它是一種高分子量的糖蛋白，能夠與細(xì)胞表面和細(xì)胞外基質(zhì)中的多種組分結(jié)合，如膠原蛋白、纖維蛋白、肝素、DNA和肌動(dòng)蛋白等。
適用細(xì)胞：干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞。
特點(diǎn)：作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，提高細(xì)胞貼壁率，增強(qiáng)細(xì)胞代謝水平，縮短細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間。
常用濃度：1µg/cm² 至 10µg/cm²。
包被條件：37°C 孵育≥2小時(shí)，或 4°C 過夜。
包被體積： 如下列表
04 鼠尾膠原蛋白Ⅰ型包被液（1mg/mL）CSP145
鼠尾膠原蛋白是膠原蛋白的一種，主要為Ⅰ型膠原蛋白，廣泛適用于內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和多種其他細(xì)胞類型的培養(yǎng)，能夠模擬細(xì)胞外基質(zhì)的環(huán)境。
適用細(xì)胞：上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞。
特點(diǎn)：可以制備成一種清晰的凝膠，提供 3D 基質(zhì)或表面涂在組織培養(yǎng)板上，促進(jìn)細(xì)胞貼壁和增殖。
常用濃度：1-5ug/cm²包被體積。
包被體積：T-25瓶2.5ml去離子水+50ul ( 1MG/ML 鼠尾膠原蛋白Ⅰ ),隨后將培養(yǎng)瓶放置4度過夜，吸出鼠尾膠原蛋白Ⅰ溶液，pbs洗2-3次后可加入細(xì)胞。
包被注意事項(xiàng)
1. 無(wú)菌操作：所有操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，避免污染。
2. 均勻覆蓋：確保包被試劑均勻分布在培養(yǎng)瓶底部，避免局部過厚或過薄。
3. 濃度優(yōu)化：根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求優(yōu)化包被試劑的濃度。
4. 孵育時(shí)間：根據(jù)試劑和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整孵育時(shí)間，確保充分包被。
5. 儲(chǔ)存條件：包被后的培養(yǎng)瓶可短期儲(chǔ)存于 4°C，但建議盡快使用以保證最佳效果。
通過選擇合適的包被試劑并遵循正確的包被步驟，可以有效提高細(xì)胞貼附和生長(zhǎng)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供可靠的細(xì)胞模型。
包被試劑是一種用于處理培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿表面的化學(xué)物質(zhì)，能夠模擬細(xì)胞在體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展和增殖。通過包被處理，培養(yǎng)表面可以更好地支持細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能表達(dá)。
本文將為您詳細(xì)介紹幾種常用的包被試劑及其特點(diǎn)，并分享包被操作的注意事項(xiàng)，助您輕松提升細(xì)胞培養(yǎng)效果！
常見的包被試劑種類和使用方法
01明膠（Gelatin）CSP132
常用于包被細(xì)胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿，以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁和增殖，具有良好的生物相容性和細(xì)胞黏附性。
適用細(xì)胞：胚胎干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等。
特點(diǎn)：價(jià)格低廉，易于使用，能夠提供良好的細(xì)胞附著支持。
使用范圍：常用于包被細(xì)胞培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿，以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁和增殖，具有良好的生物相容性和細(xì)胞黏附性。
使用濃度：1-20mg/ml 即1mg/ml-20mg/ml
包被體積：通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準(zhǔn)，通常為 T-25瓶2.5ml, T-75瓶7.5ml
包被條件：37°C 孵育≥2小時(shí)，或 4°C 過夜。
接種細(xì)胞：使用前吸除多余明膠溶液，pbs洗1-2次后可以接種細(xì)胞。
02多聚賴氨酸(PLL) CSP073
相對(duì)分子量為 70,000～300,000 的 PLL 可作為細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)基質(zhì)，能夠促進(jìn)細(xì)胞粘附和貼壁，是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的細(xì)胞粘附劑。
適用細(xì)胞：神經(jīng)元細(xì)胞、原代細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等。
特點(diǎn)：通過靜電作用增強(qiáng)細(xì)胞附著，適合難以貼壁的細(xì)胞。
常用濃度：0.01% 至 0.1% (w/v)，即 0.1mg/ml 至 1mg/ml。
包被條件：37°C 孵育≥2小時(shí)，或 4°C 過夜。通常以完全覆蓋培養(yǎng)瓶底部為準(zhǔn)，使用前吸除多余溶液，用無(wú)菌 PBS 沖洗 1-2 次。
03重組人纖連蛋白（FN）CSP044
是一種重要的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，具有多種生物學(xué)功能。它是一種高分子量的糖蛋白，能夠與細(xì)胞表面和細(xì)胞外基質(zhì)中的多種組分結(jié)合，如膠原蛋白、纖維蛋白、肝素、DNA和肌動(dòng)蛋白等。
適用細(xì)胞：干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、成纖維細(xì)胞。
特點(diǎn)：作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，提高細(xì)胞貼壁率，增強(qiáng)細(xì)胞代謝水平，縮短細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)間。
常用濃度：1µg/cm² 至 10µg/cm²。
包被條件：37°C 孵育≥2小時(shí)，或 4°C 過夜。
包被體積： 如下列表
04 鼠尾膠原蛋白Ⅰ型包被液（1mg/mL）CSP145
鼠尾膠原蛋白是膠原蛋白的一種，主要為Ⅰ型膠原蛋白，廣泛適用于內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和多種其他細(xì)胞類型的培養(yǎng)，能夠模擬細(xì)胞外基質(zhì)的環(huán)境。
適用細(xì)胞：上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌細(xì)胞。
特點(diǎn)：可以制備成一種清晰的凝膠，提供 3D 基質(zhì)或表面涂在組織培養(yǎng)板上，促進(jìn)細(xì)胞貼壁和增殖。
常用濃度：1-5ug/cm²包被體積。
包被體積：T-25瓶2.5ml去離子水+50ul ( 1MG/ML 鼠尾膠原蛋白Ⅰ ),隨后將培養(yǎng)瓶放置4度過夜，吸出鼠尾膠原蛋白Ⅰ溶液，pbs洗2-3次后可加入細(xì)胞。
包被注意事項(xiàng)
1. 無(wú)菌操作：所有操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行，避免污染。
2. 均勻覆蓋：確保包被試劑均勻分布在培養(yǎng)瓶底部，避免局部過厚或過薄。
3. 濃度優(yōu)化：根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求優(yōu)化包被試劑的濃度。
4. 孵育時(shí)間：根據(jù)試劑和實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整孵育時(shí)間，確保充分包被。
5. 儲(chǔ)存條件：包被后的培養(yǎng)瓶可短期儲(chǔ)存于 4°C，但建議盡快使用以保證最佳效果。
通過選擇合適的包被試劑并遵循正確的包被步驟，可以有效提高細(xì)胞貼附和生長(zhǎng)，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供可靠的細(xì)胞模型。
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