哈格里夫斯測(cè)試,這一在1988年首度提出的科學(xué)方法,被專門用來量化小鼠和大鼠的后爪在遭受輻射或紅外熱刺激后的熱敏感度閾值。其核心目的在于評(píng)估嚙齒類動(dòng)物,如大鼠和小鼠,對(duì)于熱痛的感知程度。這項(xiàng)測(cè)試已被廣泛應(yīng)用于探究神經(jīng)損傷與再生過程中,動(dòng)物對(duì)疼痛刺激敏感性的變化或熱痛反應(yīng)恢復(fù)的研究中。
痛覺過敏,指的是個(gè)體對(duì)疼痛刺激反應(yīng)過度敏感的狀態(tài)。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)證明,許多經(jīng)過臨床驗(yàn)證的藥物,如阿片類藥物和GABA受體增強(qiáng)劑,能夠延遲動(dòng)物爪子在熱刺激下敏感性的發(fā)作。同時(shí),足底內(nèi)角叉菜膠作為一種常用的實(shí)驗(yàn)手段,能夠加劇大鼠后爪的痛覺過敏,進(jìn)而被應(yīng)用于痛覺過敏的相關(guān)研究,比如探究嗎啡對(duì)熱痛覺過敏大鼠模型的影響。
在實(shí)驗(yàn)過程中,有害的熱刺激通過特定的玻璃裝置,集中施加于后爪的足底表面。一旦動(dòng)物因無法忍受熱刺激而將爪子移開,設(shè)備會(huì)自動(dòng)記錄下這一縮爪的延遲時(shí)間,精確到0.1秒。為了確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的安全,設(shè)定了20秒的截止延遲,以避免對(duì)動(dòng)物組織造成損傷。
以下是實(shí)驗(yàn)的具體測(cè)試步驟:
首先,選擇一個(gè)合適的房間進(jìn)行行為評(píng)估,確保環(huán)境安靜且沒有噪音和振動(dòng)的干擾,以減少動(dòng)物的焦慮反應(yīng),確保測(cè)試結(jié)果的準(zhǔn)確性。
接著,將動(dòng)物從飼養(yǎng)室轉(zhuǎn)移到測(cè)試室,并讓它們?cè)谛颅h(huán)境中適應(yīng)一段時(shí)間,通常為30至60分鐘。在此過程中,動(dòng)物可能會(huì)表現(xiàn)出對(duì)新環(huán)境的好奇心,但隨后會(huì)逐漸安靜下來。
為了讓動(dòng)物更好地適應(yīng)測(cè)試環(huán)境,建議將它們放回飼養(yǎng)室,并重復(fù)上述適應(yīng)步驟至少兩天。之后,再進(jìn)行正式的哈格里夫斯測(cè)試。
在測(cè)試前,獲取基線讀數(shù)是非常關(guān)鍵的,這有助于實(shí)驗(yàn)者了解每只動(dòng)物對(duì)熱刺激的初始反應(yīng),并優(yōu)化測(cè)試參數(shù)。
然后,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置紅外強(qiáng)度,并將紅外發(fā)射器/探測(cè)器放置在容器上,確保其正對(duì)被測(cè)試的爪子中心。接下來,密切觀察動(dòng)物的爪子,直到它們因感受到熱刺激而表現(xiàn)出退縮反應(yīng)。一旦動(dòng)物因熱刺激而移動(dòng)爪子,設(shè)備將自動(dòng)記錄反應(yīng)時(shí)間并停止計(jì)時(shí)。如果動(dòng)物的爪子移動(dòng)不是由熱刺激引起的,則該次測(cè)試數(shù)據(jù)應(yīng)被排除。
為確保動(dòng)物的安全,如果動(dòng)物在20秒內(nèi)未能做出反應(yīng),應(yīng)立即終止測(cè)試,避免潛在的傷害。
最后,為了獲得更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù),建議至少重復(fù)測(cè)試三次,并計(jì)算平均反應(yīng)時(shí)間。測(cè)試結(jié)束后,小心地將動(dòng)物放回飼養(yǎng)室,并對(duì)測(cè)試設(shè)備進(jìn)行徹底清潔,以準(zhǔn)備下一次實(shí)驗(yàn)。