許多相顯示有鍵合相的流失，當基線穩(wěn)定性受到影響時，這可以在梯度條件下被最清晰地觀察到。

盡管大多數(shù)超純C18相可以預(yù)期產(chǎn)生低柱流失，但是需要謹慎選擇替代選擇性的鍵合相，以確保在低UV波長或LC/MS下進行分析時柱流失不會引起不可預(yù)見的問題。

ACE C18-AR顯示UV下的低柱流失

色譜柱尺寸：150 x 4.6mm 流速：1.00ml/min 溫度：60°C 檢測：UV, 214nm 梯度：時間（分鐘） %B                0              5                20          95                25          95               26             5 流動相： A. 20mM KH2PO4（溶于水中）(pH 2.7) B. 35:65 (v/v) 20mM KH2PO4（溶于水中）(pH 2.7) /甲醇 化合物：1）尼古丁2）芐胺3）普魯卡因胺4）特布他林5）沙丁胺醇6）苯酚7）內(nèi)標A 8）內(nèi)標B 9）苯海拉明10）去甲替林

本實例對超純ACE C18色譜柱（頂部）的低流失特性與苯基色譜柱（中間）的中等流失特性進行了比較。

ACE C18-AR色譜柱（底部）顯示其流失水平與ACE C18相當，盡管后者包含可以提供替代選擇性的完整苯基官能團。

UV流失的比較

領(lǐng)先的C18品牌和普通替代鍵合相的評估

在相同條件下對更寬范圍的色譜柱的進一步分析證實，領(lǐng)先的高純度C18柱品牌顯示出相似的低水平色譜柱流失。

然而，傳統(tǒng)上推薦改變選擇性的替代鍵合相（即苯基，極性嵌入式，PFP和AQ型表面化學物質(zhì)）的評估顯示，所有這些非C18色譜柱均有顯著更高的流失。
ACE C18-AR將低流失水平（典型的領(lǐng)先C18色譜柱品牌）與替代選擇性相結(jié)合，從而為分析者提供了有價值的方法開發(fā)工具。

當采用MS檢測時，非C18相給分析者帶來了傳統(tǒng)上使用所出現(xiàn)的額外挑戰(zhàn)。

在極端情況下，柱流失可能會污染檢測器信號并掩蓋重要分析物。
在以下實例中，在梯度運行的18-25分鐘時段中監(jiān)測柱流失，此時有機物的百分比增加至其最大水平，因此柱流失也是最高的。

MS Spectra（左邊系列）提供了在該18-25分鐘窗口中檢測到流失的m/z裂解，而總離子色譜圖（右邊系列）闡明了在相同18-25分鐘時間段內(nèi)所獲得的流失結(jié)果。

ACE C18-AR顯示LC/MS下的低柱流失

色譜柱尺寸：150 x 3.0mm 流速：0.43ml/min 溫度：60°C 檢測：+ ve ESI模式（ThermoFisher Deca LCQ離子阱），全掃描范圍50 - 1500m/z 流動相： A. 0.1% v/v甲酸（溶于水中） B. 0.1% v/v甲酸（溶于乙腈中） 梯度： 時間（分鐘） %B                    0            5                   20          90                   25          90                   26           5

通過LC/MS分析，極性嵌入式色譜柱的TIC追蹤和MS光譜（之前通過UV檢測顯示有顯著流失）再次顯示柱流失水平較高。

來自空白運行（在沒有連接色譜柱的情況下開展）的MS光譜可以使背景系統(tǒng)流失量化。

ACE C18-AR色譜柱和領(lǐng)先的C18色譜柱均顯示與空白運行相似的流失水平，這表明正在發(fā)生的柱流失可以忽略。

結(jié)論：
ACE C18-AR相可用于為領(lǐng)先的C18色譜柱提供不同的選擇性，同時不會遇到與許多替代（即非C18）鍵合相相關(guān)的柱流失問題。