溴化乙錠(EB)為何被逐漸淘汰
瀏覽次數(shù):200 發(fā)布日期:2025-3-26
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實驗室在做瓊脂糖核酸電泳實驗時使用的經(jīng)典染色劑是溴化乙錠(EB),使用的成本較低,但是為什么被逐漸替代了呢?這是由于EB的強致癌性,實驗產(chǎn)物難以處理,而替代EB的核酸染料在安全性、實驗效率及環(huán)保性等方面具有顯著優(yōu)勢。
一、安全性提升
- 低/無毒性
替代品如達遠辰光RedView、GelRed、GelGreen、SYBR Safe等通過分子結構設計(大分子量、油性)或?qū)嶒炞C明(艾姆斯氏試驗)確認無致癌性,避免EB的強誘變性風險。例如,GelRed的廢棄物可直接倒入下水道,無需特殊處理。
- 操作防護簡化
低毒染料(如SYBR Safe)無需嚴格通風櫥操作,減少實驗人員接觸風險。
二、靈敏度與分辨率優(yōu)化
- 高靈敏度檢測
- SYBR Gold:檢測限低至20pg DNA,靈敏度是EB的100倍。
- GelRed:電泳后染色靈敏度與EB相當,且對DNA遷移影響更小。
- 多片段兼容性
部分染料(如EvaGreen)可穩(wěn)定檢測從200bp到10kb的DNA片段,優(yōu)于EB對大片段的分離效果。
三、實驗流程便捷性
- 無需脫色步驟
電泳后染色染料(如GelRed)直接觀察,省去EB染色后的脫色流程,縮短實驗時間。
- 設備兼容性
替代品光譜特性與EB接近(如312nm激發(fā)),無需更換成像系統(tǒng)即可使用現(xiàn)有設備。
四、環(huán)保與經(jīng)濟性
- 廢棄物處理簡化
部分染料(如達遠辰光RedView、GelRed、GelGreen)通過環(huán)保認證,可直接按普通垃圾處理,降低實驗室污染風險。
- 長期使用成本低
盡管單價高于EB,但無需額外防護裝備(如手套、通風柜),綜合成本更具優(yōu)勢。
五、特殊場景優(yōu)勢
- 下游實驗兼容性
GelRed染色后的DNA可直接用于膠回收,而EB染色的DNA需脫色處理。
- 抗干擾能力
SYBR Safe對Taq酶等常用分子生物學酶無抑制作用,適合qPCR驗證等實驗。
總結
替代EB的核酸染料通過
安全性升級(如達遠辰光RedView、GelRed、SYBR Safe)、
靈敏度提升(如SYBR Gold)及
操作簡化(如無需脫色)等特性,成為現(xiàn)代分子實驗的主流選擇。