顯微鏡是生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的重要工具。顯微鏡可以用來以高分辨率觀察微觀區(qū)域,但其觀察視野狹窄,因此難以了解正在觀察的是樣品的哪一部分。要使用有目鏡的顯微鏡開始觀察標(biāo)本,第一步是目視調(diào)整樣品,使其與顯微鏡的聚焦光路重合。然后,用戶必須通過目鏡執(zhí)行詳細(xì)搜索,以判斷觀察位置。這一系列的任務(wù)稱作觀察前準(zhǔn)備。如果用戶不熟悉顯微鏡的操作,這個(gè)過程可能緩慢而又反復(fù)。
APX100一體式顯微鏡的智能樣品導(dǎo)航器可自動(dòng)執(zhí)行以下任務(wù),從而幫助提升觀察前準(zhǔn)備工作的速度:
圖1.APX100的工作流程比傳統(tǒng)顯微鏡更有效率
1 宏觀圖像
捕獲樣品整體圖片的宏觀圖像有助于快速找到觀察位置。APX100系統(tǒng)獨(dú)特的寬場(chǎng)宏觀光學(xué)器件使其能夠在成像伊始快速采集概覽式宏觀圖像。
用于獲得寬場(chǎng)圖像的宏觀光學(xué)器件通常不是遠(yuǎn)心器件。這意味著在孔板的宏觀圖像中,視場(chǎng)周圍孔的形狀是失真的。具體來說,宏觀圖像中的壁面有反光,使得難以區(qū)分孔的底面。為了防止視場(chǎng)中的孔失真,可以縮窄視場(chǎng)。但這需要為每個(gè)孔采集數(shù)張圖像,并將其拼接在一起以形成最終的宏觀圖像。為了克服這些局限性,APX100系統(tǒng)為宏觀光學(xué)系統(tǒng)使用了大孔徑鏡頭(圖2),從而實(shí)現(xiàn)合格的遠(yuǎn)心度和寬視場(chǎng)。宏觀光學(xué)器件的放大倍率約為0.07倍,并且只需兩張快照就能采集托架中樣品的宏觀圖像。
2 樣品識(shí)別
智能樣品導(dǎo)航器使用基于AI(深度學(xué)習(xí))的樣品識(shí)別,可在使用載玻片的樣品托架時(shí)自動(dòng)定位宏觀圖像中的樣品。系統(tǒng)的載物臺(tái)隨后移動(dòng),以使樣品處于顯微光路中,并調(diào)整物鏡的高度,使用戶能夠立即開始高倍細(xì)節(jié)觀察。
使用AI分析樣品分為兩個(gè)階段:學(xué)習(xí)和推斷。為了進(jìn)行推斷,首先需要使用一組學(xué)習(xí)圖像對(duì)AI進(jìn)行訓(xùn)練。幸運(yùn)的是,智能樣品導(dǎo)航器的樣品識(shí)別功能已經(jīng)配備了一個(gè)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),并且該網(wǎng)絡(luò)事先使用多種類型的樣品進(jìn)行過訓(xùn)練。除了HE染色組織樣品外,辨別類還包括非染色組織樣品,如用熒光染色素染色的實(shí)驗(yàn)室小鼠腦組織切片,以及蓋玻片。
將捕獲的宏觀圖像輸入經(jīng)過訓(xùn)練的AI網(wǎng)絡(luò)(圖3)以探測(cè)所觀察的玻片上的組織和蓋玻片時(shí),就會(huì)執(zhí)行推斷。系統(tǒng)會(huì)將標(biāo)本識(shí)別結(jié)果顯示在一個(gè)綠色框架中,以協(xié)助用戶在成像實(shí)驗(yàn)期間進(jìn)行識(shí)別(圖3)。
3 觀察支持
智能樣品導(dǎo)航器通過以下功能幫助進(jìn)一步提高觀察的便利性:
1、在顯示的宏觀圖像上指定觀察位置,并快速移動(dòng)到觀察位置(見圖4)。
2、使用樣品識(shí)別結(jié)果采集高分辨率概覽圖像(見圖5)。
3、發(fā)現(xiàn)觀察過程中可能與樣品托架發(fā)生碰撞的區(qū)域(見圖6)。
摘要
APX100系統(tǒng)的智能樣品導(dǎo)航器改進(jìn)了傳統(tǒng)顯微鏡的觀察前工作流程。在觀察樣品之前,不需要手動(dòng)移動(dòng)載物臺(tái)來找到樣品、調(diào)整物鏡的高度以及查找觀察位置,智能樣品導(dǎo)航器將這一過程自動(dòng)化,從而大大提高了效率。
只需一次單擊,智能樣品導(dǎo)航器就能找到樣品,將其移至顯微觀察光路,并調(diào)整物鏡的高度。整個(gè)過程只需大約十秒。采集的宏觀圖像使您能夠立即檢查您想觀察的位置、快速移動(dòng)載物臺(tái)到觀察位置并開始觀察。