高架十字迷宮實(shí)驗原理及實(shí)驗操作介紹
瀏覽次數(shù):796 發(fā)布日期:2024-4-18
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一、實(shí)驗原理
高架十字迷宮實(shí)驗是評價嚙齒類動物焦慮反應(yīng)的實(shí)驗方法 , 相較傷害性刺激所致小鼠焦慮行為檢測(如電刺激 、 噪聲刺激 、 飲食剝奪等), 該實(shí)驗具有操作簡單的優(yōu)點(diǎn) , 能直觀反映小鼠的條件應(yīng)答 。EPM實(shí)驗由開臂和閉臂各兩條組成 , 呈十字形交叉 , 交接部分為中央?yún)^(qū) , 距地面有一定高度 。其原理是由于面對新事物開臂小鼠會產(chǎn)生好奇心去探究 , 而它們有嗜暗的天性(閉臂), 兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為,產(chǎn)生焦慮心理。
二、實(shí)驗步驟
①實(shí)驗之前,一定要確保高架十字迷宮整個裝置的清潔。實(shí)驗動物提前運(yùn)送到行為學(xué)實(shí)驗室專用臨時籠架 ,適應(yīng)環(huán)境至少3H左右, 減少動物緊張。
②將實(shí)驗動物從飼養(yǎng)籠中取出,實(shí)驗動物盡量背向?qū)嶒瀱T,將動物輕輕放在儀器宮體的中央?yún)^(qū)域,動物面向開臂,然后實(shí)驗員迅速安靜的離開;
③打開SuperMaze或者VisuTrack動物行為分析軟件,跟蹤動物在高架十字迷宮儀器內(nèi)的軌跡運(yùn)動,自動計算指標(biāo),通常實(shí)驗時長為5min;
④實(shí)驗結(jié)束后,取出實(shí)驗動物,放入飼養(yǎng)籠,做好實(shí)驗完成動物的標(biāo)記信息,同時,用酒精和紙巾清潔迷宮。
三、實(shí)驗指標(biāo)
①進(jìn)入開放臂次數(shù):進(jìn)入到任一開放臂的次數(shù),以動物的四肢均進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)或者以動物身體80%進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)。
②開臂活動:動物四肢全部進(jìn)入或者身體80%進(jìn)入開臂內(nèi)的持續(xù)時間。
③進(jìn)入閉臂次數(shù):進(jìn)入到任一閉臂的次數(shù),以動物的四肢均進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)或者以動物身體80%進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)。
④閉臂活動:動物四肢全部進(jìn)入或者身體80%進(jìn)入閉臂內(nèi)的持續(xù)時間。
⑤閉臂后腿直立次數(shù):也叫閉臂支撐性站立,動物在閉臂前腿抬起以后腿支持身體直立的次數(shù)。
⑥中央?yún)^(qū)域活動:中央?yún)^(qū)域指的是開臂和閉臂鏈接交叉的區(qū)域,實(shí)驗動物在這個區(qū)域內(nèi)的活動路程和滯留時間。
四、注意事項
①實(shí)驗開始時, 實(shí)驗者需要手持小鼠使其背對實(shí)驗者放置在開臂與閉臂的接合處, 且讓小鼠面對開臂若面對閉臂, 實(shí)驗結(jié)果將受很大影響。
②其他一些可能影響實(shí)驗結(jié)果的事項包括小鼠的年齡、性別、營養(yǎng)及健康狀態(tài)需基本保持一致。
③迷宮宮體距離地面的高度不宜過高或者過低,根據(jù)實(shí)驗動物的大小確定。
④可以選擇一些白色或者黑色的吸水紙鋪在迷宮底部,對于實(shí)驗效率以及除味效果上面,更加合適。
⑤務(wù)必提前至少3小時,將實(shí)驗動物放在實(shí)驗室適應(yīng),減少動物對新環(huán)境的不安情緒。