自動(dòng)采血系統(tǒng)是近年興起的臨床及實(shí)驗(yàn)室血液采集及管理系統(tǒng)，可替代人工采血方法并優(yōu)化采血作業(yè)流程，可有效控制采血過(guò)程對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)分析結(jié)果的影響。自動(dòng)采血系統(tǒng)建立在精確的蠕動(dòng)泵基礎(chǔ)上，有效控制流體的輸送，搭配同軸感應(yīng)器確保收集到的是純血樣品。低漏失模式可把先采集的稀釋血液重新回補(bǔ)到動(dòng)物體內(nèi)，最大程度地減少動(dòng)物血液量的丟失。自動(dòng)采血系統(tǒng)可在動(dòng)物清醒自由活動(dòng) 狀態(tài)下完成連續(xù)在線取血，既降低了動(dòng)物在取血過(guò)程中的緊張性，又保證了動(dòng)物良好的生命狀態(tài)。大鼠血樣采集及檢測(cè)系統(tǒng)見(jiàn)圖 1。
 

圖 1.自由活動(dòng)大鼠血樣采集及檢測(cè)系統(tǒng)
 

采用高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) (HPLC-QQQ-MS)測(cè)定血漿中青藤堿含量的方法：
SD大鼠頸總靜脈插管，待清醒后按40 mg·kg ^-1腹腔注射青藤堿，應(yīng)用自動(dòng)采血系統(tǒng)在大鼠自由活動(dòng)狀態(tài)下采集樣品。血漿樣品中加入內(nèi)標(biāo)(磷酸可待因)，乙腈沉淀蛋白，流動(dòng)相乙腈-水(含0.1%甲酸銨) 梯度洗脫。質(zhì)譜采用電噴霧電離源(ESI)，掃描方式為多反應(yīng)離子監(jiān)測(cè)模式 (MRM)，定量分析離子對(duì)分別為青藤堿 m/z 330.0，磷酸可待因 m/z 300.0。利用 WinNonlin 軟件計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

結(jié)果:
血漿中青藤堿在 5. 0 ～ 500. 0 μg·L ^-1線性關(guān)系良好，定量下限 1 μg·L ^-1，樣品處理方法的提取回收率 ＞ 88% ，日內(nèi)及日間準(zhǔn)確度 101. 08% ～ 111. 08% ，RSD 均 ＜ 10% ，穩(wěn)定性良好。血漿中青藤堿的達(dá)峰時(shí)間( tmax )，藥峰濃度(Cmax )，藥時(shí)曲線下面積 (AUC0-24 h )，表觀分布容積(Vz /F)，清除率(CL/F)，平均駐留時(shí)間(MRT0-24 h )分別為(1. 65 ± 1. 48) h，(210. 43 ± 96. 35) μg· L^-1，(1 053. 80 ± 427. 69) h·μg·L ^-1，(252. 65 ± 57. 36) L·kg^-1，(30. 37 ± 11. 85) L·h^-1·kg^-1，(5. 15 ± 2. 47) h。

結(jié)論:
生物樣品的采集多采用傳統(tǒng)的眼眶取血、大鼠尾靜脈取血等，存在采集樣品不連續(xù)，易損失，采集的血液可能溶血、凝血，動(dòng)物失血過(guò)多導(dǎo)致?tīng)顟B(tài)欠佳等問(wèn)題;藥動(dòng)學(xué)結(jié)果分析則普遍采用經(jīng)典房室模型作為模型擬合方法。本實(shí)驗(yàn)采用自動(dòng)采血技術(shù)從清醒自由活動(dòng)大鼠頸靜脈取血，結(jié)合 HPLC-QQQ-MS 檢測(cè)方法分析大鼠單次腹腔注射青藤堿后血漿中藥物濃度，利用非房室模型模擬合青藤堿在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過(guò)程，提供客觀真實(shí)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，為青藤堿藥效-藥動(dòng)學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 應(yīng)用自動(dòng)采血系統(tǒng)采血全過(guò)程中，未觀察到大鼠有明顯不適反應(yīng)，儀器對(duì)紅細(xì)胞比容(Hct) 監(jiān)測(cè)的結(jié)果顯示，同一只大鼠連續(xù)采血的 24 h 內(nèi)，Hct 無(wú)明顯下降，提示大鼠血液紅細(xì)胞體積比未因采血受到明顯影響，采集血液樣本為不含稀釋血的純血樣本。運(yùn)用自動(dòng)采血系統(tǒng)對(duì)大鼠進(jìn)行血樣采集與傳統(tǒng)的大鼠眼眶取血和尾靜脈取血相比，具有采樣精度高、人為因素影響小、樣本易保存等優(yōu)勢(shì)，使藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程更真實(shí)準(zhǔn)確。

文獻(xiàn)來(lái)源：趙小亮,李濤,劉洋,張美玉,陳躍等.基于自動(dòng)采血系統(tǒng)與HPLC-QQQ-MS的青藤堿藥動(dòng)學(xué)分析[R].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志.2015

 

END

 

想了解更多內(nèi)容，獲取相關(guān)咨詢(xún)請(qǐng)聯(lián)系

 電話 ： +86-0731-84428665    

聯(lián)系人：伍經(jīng)理 +86-180 7516 6076