電針刺激對抑郁大鼠曠場實驗及水迷宮實驗中的行為影響
1材料與方法
1.1材料
1.1.1實驗動物
選取32只8周齡SPF級SD雄性大鼠，體重約180~220g。飼養(yǎng)環(huán)境：允許大鼠在恒定溫度、濕度和光暗循環(huán)（20~25℃；55%±10%；7：00~19：00光照循環(huán)）下自由飲水和攝食。
1.1.2主要試劑和儀器
SDZ-ⅡB型華佗牌電子針療儀（蘇州醫(yī)療用品廠有限公司，中國），visutrack動物行為分析系統(tǒng)（上海欣軟信息科技有限公司）；XR-XZ301 曠場實驗箱，XR-XM101Morris水迷宮（上海欣軟信息科技有限公司）
1.2方法
1.2.1動物分組與造模
將SD大鼠按曠場實驗隨機分為對照組、模型組、NLRP3阻斷劑（MCC950）組、電針（EA）組，每組8只。除對照組外，其余各組皆采用孤養(yǎng)聯(lián)合慢性不可預(yù)知性溫和應(yīng)激（CUMS）復(fù)制大鼠抑郁模型。應(yīng)激方法包括：晝夜顛倒12h/12h、4℃冰水浴5min、禁食24h、禁水24h、夾尾1min、潮濕墊料24h、熱板52℃5min，各組大鼠每天采用同1種刺激方式，每種刺激方式使用3~4次，且同種刺激不連續(xù)出現(xiàn)。
1.2.2干預(yù)治療
在大鼠每天應(yīng)激后1h，給予NLRP3阻斷劑MCC950和電針組干預(yù)治療。MCC950組[9]：將MCC950粉末溶解在無菌生理鹽水中，制成3mg/kg的MCC950溶液，大鼠放置于固定裝置中，用酒精擦拭鼠尾，使用1mL的注射器將MCC950溶液緩慢注射入側(cè)尾靜脈，給藥體積為1mL/kg。電針組：參考《實驗針灸學(xué)》，選擇“百會”和“印堂”穴，將SD大鼠固定在鼠板上，采用華佗牌針（0.25×13mm）向后平刺4~6mm，針柄處連接華佗牌SDZ-IIB型電子針療儀，電流輸出強度1~2mA，疏密波型，刺激20min，每日1次，連續(xù)21d。對照組給予相同時間相同時長的固定。
1.2.3曠場實驗
分別于造模前和治療結(jié)束后，進行曠場實驗，將大鼠放入黑色敞箱（100cm×100cm×40cm）角落，觀察4min，記錄各組大鼠后3min內(nèi)水平運動格子數(shù)（四爪皆入記1次）和垂直豎立次數(shù)（兩爪騰空放下記1次），以總運動量判斷大鼠自主活動能力。
1.2.4Morris水迷宮實驗
在治療結(jié)束后，第1~4天進行定位航行實驗檢測大鼠學(xué)習(xí)能力，每天將大鼠從4個不同象限面向池壁放入，觀察60s內(nèi)大鼠爬上平臺的逃避潛伏（Escapelatency，EL）。第5天進行空間探索實驗檢測大鼠記憶能力，移除平臺后大鼠從對立象限放入，記錄90s內(nèi)大鼠在目標(biāo)象限的空間探索時間（spaceexplorationtime，SET）。
1.3統(tǒng)計學(xué)分析
采用統(tǒng)計軟件SPSS17.0進行統(tǒng)計分析，計量資料以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用單因素方差（One-way-ANOVA）分析，不服從正態(tài)分布采用非參數(shù)檢驗，P<0.05為具有統(tǒng)計學(xué)意義。
2結(jié)果
2.1造模前后自主活動變化
曠場實驗結(jié)果如圖1所示，造模前各組間大鼠自主活動次數(shù)無明顯差異（P>0.05）；給藥后，與對照組比較，模型組大鼠活動量明顯下降，電針刺激或藥物干預(yù)后，大鼠的自主活動能力明顯增加（P<0.05，P<0.01），有顯著性差異；提示，電針可明顯改善抑郁癥大鼠的抑郁樣行為。
2.2學(xué)習(xí)記憶能力變化
Morris水迷宮實驗檢測結(jié)果如圖2，3所示，給藥結(jié)束后前4d進行逃避潛伏期測試，第5天進行空間探索時間測試，與對照組比較，模型組大鼠逃避潛伏期明顯增加，空間探索時間顯著減少；與模型組比較，電針組和NLRP3阻斷劑組大鼠的逃避潛伏期相對減少，空間探索時間有所增加（P<0.05，P<0.01），差異有顯著性；提示，電針應(yīng)激可以加強抑郁大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。
3 討論
本研究采用行為學(xué)評價系統(tǒng)檢測證實，電針刺激抑郁癥大鼠的百會和印堂穴位可明顯改善其抑郁樣行為，以及學(xué)習(xí)記憶能力。
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