VisuGait 動(dòng)物步態(tài)分析系統(tǒng)(上海欣軟)是一個(gè)完整的定量評(píng)估鼠類模型中動(dòng)物腳步和步態(tài)的工具。步態(tài)分析系統(tǒng)的核心部件是步行臺(tái),老鼠可以從步行臺(tái)的一端行走到另一端。該系統(tǒng)采用腳印光亮折射技術(shù),通過(guò)置于步行臺(tái)下方的高速攝像機(jī)捕獲真正的腳印。該技術(shù)還能夠探測(cè)到腳步壓力差異,這是動(dòng)物行走時(shí)體重在其四個(gè)腳爪上分布不同的結(jié)果。動(dòng)物步態(tài)分析系統(tǒng)的軟件可以處理視頻數(shù)據(jù)。依據(jù)每個(gè)腳步的尺寸、位置、移步動(dòng)態(tài)和壓力,計(jì)算很多參數(shù),用于定性和定量分析腳步和步態(tài)。
VisuGait動(dòng)物步態(tài)分析系統(tǒng),型號(hào):XR-FP101,上海欣軟
綜述前言為了彌補(bǔ)藥物誘導(dǎo)的行為學(xué)測(cè)試方法存在的種種缺陷,滿足日益增長(zhǎng)的基礎(chǔ)研究需求,諸多非藥物誘導(dǎo)的行為學(xué)測(cè)試方法相繼被應(yīng)用于PD 模型的測(cè)試與評(píng)價(jià)。其中步態(tài)分析方法已然成為研究 PD 嚴(yán)重程度的重要方法。常用的步態(tài)分析方法包括: 評(píng)估步行速度、擺動(dòng)和站立時(shí)間的跑步機(jī)運(yùn)動(dòng)測(cè)試; 評(píng)估前肢使用不對(duì)稱性的氣瓶測(cè)試和評(píng)估運(yùn)動(dòng)起始狀態(tài)的前肢運(yùn)動(dòng)不能測(cè)試; 此外,還有曠場(chǎng)測(cè)試、旋轉(zhuǎn)測(cè)試、游泳測(cè)試和筑巢測(cè)試等。然而,這些測(cè)試只能單一測(cè)量步態(tài)的動(dòng)態(tài)或靜態(tài)變化,可觀察到的變化通常較弱。而且這些測(cè)試的指標(biāo)大多應(yīng)用于單側(cè)損傷的動(dòng)物,因此不足以證明雙側(cè)受傷動(dòng)物模型的功能缺陷。而 VisuGait動(dòng)物步態(tài)分析系統(tǒng)(上海欣軟)提供了一種評(píng)估步態(tài)功能的自動(dòng)方法,它可以同時(shí)測(cè)量大量的動(dòng)態(tài)和靜態(tài)步態(tài)參數(shù),并且可以檢測(cè)出對(duì)于嚙齒動(dòng)物研究特別有價(jià)值的肢間協(xié)調(diào)的空間指標(biāo)與時(shí)間指標(biāo)。因此,我們使用VisuGait 步態(tài)分析儀來(lái)驗(yàn)證和評(píng)估 MPTP 誘導(dǎo)的雙側(cè)病變 PD小鼠模型的步態(tài)變異性。
實(shí)驗(yàn)方法PD 造模方法: 將雄性 C57BL /6 小鼠隨機(jī)分為: 空白對(duì)照組、MPTP 模型組。動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)7d后,每只腹腔注射給予 MPTP 30 mg /kg,連續(xù) 5d。空白組給予相應(yīng)體積的生理鹽水。
實(shí)驗(yàn)期間,每天觀察動(dòng)物一般情況: 包括進(jìn)食、體重等變化。
本測(cè)試用來(lái)評(píng)價(jià)小鼠的自然運(yùn)動(dòng)行為及運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性。建議可使用小動(dòng)物步態(tài)分析儀 ( VisuGait, 上海欣軟,中國(guó)) 檢測(cè),實(shí)驗(yàn)前訓(xùn)練 3d。檢測(cè)時(shí)使小鼠自由穿過(guò)設(shè)定長(zhǎng)度的檢測(cè)通道,利用內(nèi)光源腳印折射技術(shù)對(duì)攝像頭拍攝視頻中的足印進(jìn)行高效的計(jì)算機(jī)處理,在自然行走情況下評(píng)估小鼠運(yùn)動(dòng)情況。此過(guò)程全部在暗室環(huán)境內(nèi)完成,每只小鼠至少接受三次檢測(cè)。
結(jié)果為了評(píng)價(jià)MPTP誘導(dǎo)PD模型損傷后小鼠運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)性變化,我們使用了VisuGait系統(tǒng)檢測(cè)了小鼠步態(tài)變化,捕獲大量代表性動(dòng)態(tài)視頻和圖片( 圖 1) 。從圖中我們可以看出,空白對(duì)照組小鼠腳步以交替型為主,且步幅大小均一、步數(shù)穩(wěn)定; MPTP 模型組小鼠腳步模式混亂、步態(tài)紊亂異常、步幅大小不一,三點(diǎn)支撐的增加明顯。
經(jīng)分析發(fā)現(xiàn): 模型組與空白對(duì)照組相比,通過(guò)某特定距離的時(shí)間( run duration) 、最大速率變化( maximum variation) 、支撐相時(shí)間( stance) 、腳步周期( step cycle) 顯著增加,平均速度( average speed) 、單位時(shí)間腳步數(shù) ( cadence ) 、擺動(dòng)速度 ( swing speed) 、步幅( stride length) 顯著降低。 上述8項(xiàng)指標(biāo)變化差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P<0. 05) 。
討論
為了對(duì) MPTP 誘導(dǎo)的 PD 小鼠進(jìn)行更為直觀且無(wú)創(chuàng)的行為學(xué)評(píng)估,在本實(shí)驗(yàn)過(guò)程 中引入了VisuGait動(dòng)物步態(tài)分析技術(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,和空白對(duì)照組相比,MPTP 誘導(dǎo)的模型組小鼠運(yùn)動(dòng)遲緩、運(yùn)動(dòng)協(xié)調(diào)能力顯著下降,表現(xiàn)為通過(guò)某特定距離的時(shí)間 ( run duration ) 、最大速率變化 ( maximum variation) 、支撐相 時(shí)間 ( stance ) 、腳步周期 ( step cycle) 顯著增加,平均速度( average speed) 、單位時(shí)間腳步數(shù)( cadence) 、擺動(dòng)速度( swing speed) 、步幅( stride length) 顯著降低。以上結(jié)果表明,VisuGait動(dòng)物步態(tài)分析技術(shù)能夠敏銳地捕捉到 PD 小鼠的步態(tài)平衡障礙和肢內(nèi)協(xié)調(diào)缺陷。
行動(dòng)遲緩是PD的主要行為學(xué)標(biāo)志之一,擺動(dòng)速度、步幅、腳步周期等都是與移動(dòng)性分析相關(guān)的參數(shù)。PD小鼠模型的步幅和擺動(dòng)速度明顯降低,可能是由于 MPTP作用誘導(dǎo)小鼠肌肉僵硬和運(yùn)動(dòng)功能減退所導(dǎo)致的結(jié)果,這與PD患者的癥狀基本一致,小鼠腳步周期的增大主要是由于爪和玻璃板之間的接觸較長(zhǎng),該參數(shù)的變化也同樣與雙側(cè)6-OHDA大鼠模型的步態(tài)評(píng)估結(jié)果相吻合。而PD模型小鼠在單位時(shí)間腳步數(shù)明顯減少,則是由于小鼠步幅的減少并不能抵消步行周期的增大所致。同時(shí),MPTP誘導(dǎo)損傷后,還表現(xiàn)出擺動(dòng)速度降低和支撐相時(shí)間的延長(zhǎng)。這些指標(biāo)變化進(jìn)一步說(shuō)明了VisuGait步態(tài)分析參數(shù)可反映PD小鼠出現(xiàn)步態(tài)紊亂和步態(tài)平衡障礙。
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3、動(dòng)物主動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物被動(dòng)步態(tài)分析、動(dòng)物自由步態(tài)分析(內(nèi)測(cè)中)
4、睡眠剝奪儀、體溫維持儀、智能熱板儀、轉(zhuǎn)棒疲勞儀、鼠尾光照測(cè)痛儀等
1、光遺傳、無(wú)線光遺傳
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3、電生理信號(hào)采集系統(tǒng)(腦電、肌電等)