穿梭箱實驗視頻分析系統(tǒng)使用方法
一、系統(tǒng)介紹
穿梭箱實驗( Xmaze shutter)是定量測定動物行為學(xué)改變的經(jīng)典實驗,屬于經(jīng)典的聯(lián)合型學(xué)習(xí)條件反射,動物通過學(xué)習(xí)能回避有害的刺激。上海欣軟SuperAPAS穿梭箱底部為不銹鋼柵,使用電流加非條件刺激,電擊動物足底。頂部配置有噪聲發(fā)生器或光源,用來產(chǎn)生條件刺激。條件刺激數(shù)秒鐘后電擊。若在鈴聲刺激安全間隔期內(nèi)大鼠逃向安全區(qū)則為主動回避反應(yīng);如果在條件刺激安全間隔期內(nèi)大鼠未逃向安全區(qū),則通以交流電擊后逃向安全區(qū)的為被動回避反應(yīng)陽性,否則為主動、被動回避反應(yīng)陰性,此為一個循環(huán)周期。經(jīng)過反復(fù)訓(xùn)練后,只給條件刺激,大鼠即逃到對側(cè)安全區(qū)以逃避電擊,此即形成了條件反射或稱主動回避反應(yīng),計算機自動控制系統(tǒng)可記錄相關(guān)的動物行動參數(shù)。主動回避時間是指動物接受條件刺激的時間長短,該值越短,說明動物主動回避反應(yīng)越迅速,學(xué)習(xí)記憶能力越強。
上海欣軟SuperAPAS穿梭箱實驗視頻分析系統(tǒng)是一款基于視頻圖像識別處理的動物主被動回避行為檢測系統(tǒng),采用上海欣軟公司自主研發(fā)的幀對幀算法(Fream to Fream)實時判斷實驗過程的主動回避以及被動回避行為。該系統(tǒng)完全可以替代我們的實驗員,降低了早先人眼觀測記錄的誤差。SuperAPAS對實驗過程錄像并對圖像跟蹤分析,同時支持1-4只動物實驗,最多可擴展至8只動物。指標(biāo)數(shù)據(jù)自動輸出到PC機,可對實驗過程進(jìn)行分析并可打印實驗報告。被廣泛用于學(xué)習(xí)記憶功能、認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、神經(jīng)藥理學(xué)、認(rèn)知功能退行性變性等實驗研究方面的研究,簡單易操作,容易判別結(jié)果,可信度高,既可以單獨作為檢測實驗提供課題參數(shù),也可以作為其他學(xué)習(xí)記憶和認(rèn)知功能實驗的輔助或預(yù)篩選實驗。目前被廣泛用于大、中專醫(yī)科院校、科研單位進(jìn)行實驗教學(xué)、抗抑郁類藥物以及恐懼記憶機制的研究工作。
二、軟件平臺特性
1.支持大小鼠:在穿梭箱實驗過程中,大鼠和小鼠可能會表現(xiàn)出不同的狀態(tài)行為。SuperAPAS軟件可以同時應(yīng)用于大鼠和小鼠實驗。
2.高通量:SuperAPAS軟件支持1-4只動物同時開展實驗,最多可擴展至8只動物。所有的測試指標(biāo)都是在實驗過程中實時同時產(chǎn)生的,錄像完畢可以將測試指標(biāo)一鍵導(dǎo)出至Excel表。每只動物可以單獨開始和單獨停止分析。
3.多種刺激類型:SuperAPAS軟件可以支持條件刺激和非條件刺激等多種刺激類型:條件刺激包括聲刺激和光刺激,非條件刺激類型包括電刺激。其中,聲刺激可調(diào)強度0-255級,音頻范圍10-20000HZ,光刺激強度0-255級可調(diào),電刺激范圍0-4A。
4.狀態(tài)實時顯示:每只動物視頻采集分析過程中后,軟件可以實時顯示動物狀態(tài)行為與條件刺激的對應(yīng)關(guān)系,讓用戶可以實時了解實驗進(jìn)展,同時可以在實驗結(jié)束后對數(shù)據(jù)進(jìn)行校正核定。
5先進(jìn)的過濾算法.:SuperAPAS軟件支持灰度識別算法和背景識別算法,用戶可以通過實驗背景的復(fù)雜程度選擇合適的識別算法。同時,SuperAPAS提供了多種檢測過濾算法,比如可以有效過濾電柵欄泛光引起的噪點、可以過濾光刺激過程中引起的局部變亮、能夠有效濾除動物“嗅探式的穿梭行為”和“搖擺不定的穿梭行為”。
6.先進(jìn)的圖像處理技術(shù):穿梭箱系統(tǒng)采用先進(jìn)的圖像處理算法,將被測動物的形狀變化以及其它因素綜合處理,得到的因子作為判決條件,同時還設(shè)有電柵欄消除閾值,其穩(wěn)定性和可靠性是通常采用重心跟蹤算法所無法匹及的,改功能包括:
(1)穿梭箱系統(tǒng)具有獨特的數(shù)據(jù)分析和處理方式,既可以按照刺激發(fā)生的事件進(jìn)行分析,也可以按照時間進(jìn)行分段分析,數(shù)據(jù)可以導(dǎo)出到Excel中進(jìn)行二次分析;
(2)支持使用攝像頭進(jìn)行實時跟蹤,也支持使用事先錄制好的視頻文件進(jìn)行離線跟蹤,分辨率可達(dá)到640×480;
(3)在使用攝像頭進(jìn)行實時跟蹤的同時,可以進(jìn)行實況錄像;
(4)獨創(chuàng)的事件關(guān)系圖功能,能夠使實驗人員更好地將外界刺激與動物的行為關(guān)聯(lián)起來。
三、硬件特性
1.superShocker控制器
SuperShocker控制器為全數(shù)字多功能刺激器,是采用先進(jìn)的微處理器工業(yè)控制技術(shù)研發(fā)的全數(shù)字控制恒定電流電刺激器、聲音刺激器和光刺激器,適用于穿梭、跳臺、Y迷宮、八臂迷宮、條件性恐懼等動物行為學(xué)實驗。在動物身體的不同部位接觸電極時,通過動物身體的刺激電流保持恒定,避免了對動物組織的傷害。
SuperShocker全數(shù)字多功能刺激器同時提供雙電極直流輸出和9電極交流/直流脈沖擾頻輸出,可以同時滿足用戶已有電柵欄的規(guī)格要求。其9電極交流/直流脈沖擾頻輸出可以避免原雙電極輸出時,動物接觸同一極性電擊而逃避電擊的問題,通過在9根電極上電流極性的不斷切換,使動物在任何情況下都能接受到電刺激。
SuperShocker全數(shù)字多功能刺激器的A/B通道切換輸出功能專為穿梭實驗設(shè)計。
2.穿梭箱
穿梭箱包涵大小鼠實驗箱、視頻盒以及電柵欄。
(1)大小鼠實驗箱適合開展大鼠和小鼠的穿梭實驗,更換插板后也可用于避暗實驗。
小鼠規(guī)格:266mm*160mm*200mm,大鼠規(guī)格:480mm*240mm*300mm
(2)視頻盒:視頻盒可以用于實驗視頻錄制,可以控制實驗箱內(nèi)部的光線強度。
(3)電柵欄:電柵欄采用9路電流循環(huán)輸出設(shè)計,可以杜絕動物刺激“盲區(qū)”。
四.刺激指標(biāo):
(1)觀察時間:動物完成所有測試所花費的實驗時間,該時間越短,說明動物記憶能力越強。
(2)總路程:動物在整個實驗中的運行路程,可初步反映動物的活動量大小。
(3)穿梭總次數(shù):動物在適應(yīng)期、刺激期以及刺激間隔期內(nèi)的穿梭次數(shù)總和。
(4)主動回避次數(shù):動物在條件刺激(聲光刺激)期內(nèi)成功逃至安全區(qū)為主動回避。
(5)被動回避次數(shù):動物在非條件刺激(電刺激)期內(nèi)逃至安全區(qū)為被動回避。
(6)無反應(yīng)次數(shù):動物在所有刺激過程中沒有發(fā)生逃避行為,稱之為無反應(yīng)。
此外,軟件還可以測試以下指標(biāo):
五.系統(tǒng)組成:
(1)通用穿梭實驗箱:含攝像頭、照明裝置(燈光亮度可調(diào));
(2)大小鼠組件:糞便清理盒、電柵欄;
(3)視頻采集卡:USB、PCI插槽兩種可選;
(4)SuperShocker動物行為學(xué)主控器:控制加電、燈光、揚聲器;
(5)視頻線;電源線;軟件安裝U盤;加密狗;
(6)畫面合成器1臺
(7)(選配)通用隔音箱:含貓眼裝置、夾層吸音棉