光是電磁波，波長100nm～400nm稱為紫外光， 400nm～780nm之間的光可被人眼觀察到，大子780nm稱為紅外光。人們只所以能夠看到色彩，是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色，是因為植物吸收了光中的紅色光譜。酶標(biāo)儀測定的原理是在特定波長下，檢測被測物的吸光值。
　　檢測單位：
　　光通過被檢測物，前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量，特定波長下，同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關(guān)系。
　　檢測單位用OD值表示， OD是optical delnsity（光密度）的縮寫，表示被檢測物吸收掉的光密度， OD＝1og（1／trans），其中trans為檢測物的透光值。根據(jù)Bouger-amberT-beer法則，OD值與光強度成下述關(guān)系：
E＝OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度， Ι0 為在檢測物之前的光強度，Ι為從被檢測物出來的光強度。
　　OD值由下述公式計算：
　　E＝OD=C×D×E
　　C為檢測物的濃度
　　D為檢測物的厚度
　　E為摩爾因子
　　在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長，在此波長下，此物質(zhì)能夠吸收最多的光能量。如果選擇其它的波長段，就會造成檢測結(jié)果的不準(zhǔn)確。因此，在測定檢測物時，我們選擇特定的波長進行檢測，稱為測量波長。
　　但是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收，為了消除這種非特異性吸收，我們再選取一個參照波長，以消除這個不準(zhǔn)確性。在參照波長下，檢測物光的吸收最小。檢測波長和參照波長的吸光值之差可以消除非特異性吸收。
　　Anthos 酶標(biāo)儀檢測值計算
　　儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量，轉(zhuǎn)換成二進位數(shù)字信號，最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為 0％，沒有檢測物的透光值為100％。則實際檢測中，檢測物的透光值均在 0％一100％之間。透光值
的計算如下：
　　T＝（Meas—Min）／（Max—Min）
　　其中T為透光值， Meas為檢測的二進位數(shù)值， Min為在 0％的情況下檢測的二進位數(shù)值， Max為在100％的情況下檢測的二進位數(shù)值，舉例如下：
　　MaX=3600 Mn=20 Meas＝30
　　T=（30-20）/3600-20)＝0．0028
　　OD＝1og（1/T）=1og（1/0.0028）=2.552
　　Anthos 酶標(biāo)儀的中心定位
　　儀器會自動對酶標(biāo)孔進行中心定位，中心定位是要消除酶標(biāo)孔底的凸凹引起的厚薄不均帶來檢測的不準(zhǔn)確。在對每一個酶標(biāo)儀進行檢測時，儀器其實要進行35個點的測量，選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
　　光源的參照通道
　　參照通道是用來校準(zhǔn)由于電壓不穩(wěn)或燈泡磨損帶來的影響。
　　酶標(biāo)儀的用途和其它提示
　　用于ELISA試劑的測定，廣泛用于各種實驗室，包括臨床實驗室。
　　質(zhì)量控制
　　質(zhì)量控制是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質(zhì)量控制。
　　空白校正
　　有一些試劑盒的說陰書將空白孔設(shè)置為空氣，其它大多數(shù)空白孔的設(shè)置是用試劑來設(shè)置的，請按照試劑盒的說明書要求進行。
　　檢測結(jié)果的解釋
　　由于有相當(dāng)多的因素會影響檢測的結(jié)果，如不同的酶標(biāo)板，檢測試劑的體積，都會造成OD值的不，因此，只有使用同一酶標(biāo)板反應(yīng)的試劑檢測結(jié)果才能比較和分析。對結(jié)果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行。
酶標(biāo)儀的使用注意事項
1、工作環(huán)境
　　酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器，因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，還能夠延長其使用壽命。根據(jù)DIN VDE 0871條例，儀器應(yīng)放置在無磁場和干擾電壓的位置。依據(jù)DIN 45 635 －19條例：
　　儀器應(yīng)放置在低于40分貝的環(huán)境下。
　　為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。
　　操作時環(huán)境溫度應(yīng)在15℃－40℃之間，環(huán)境濕度在15％－85％之間。
　　操作電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。
　　操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽，煙塵。
　　保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。
2、操作注意事項
　　酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果，因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果，試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果，操作過程隨意性較大，在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時糾正操作習(xí)慣，會造成較大誤差。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項：
　　使用加液器加液，加液頭不能混用。
　　洗板要洗干凈。如果條件允許，使用洗板機洗板，避免交叉污染。
　　嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時間準(zhǔn)確。
　　在測量過程中，請勿碰酶標(biāo)板，以防酶標(biāo)板傳送時擠傷操作人員的手。
　　請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成后請洗手。
　　如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害，請嚴(yán)格按照試
　　劑盒的操作說明，以防對操作人員造成損害。
　　如果儀器接觸過污染性或傳染性物品，請進行清洗和消毒。
　　不要在測量過程中關(guān)閉電源。
　　對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實際情況及時修改參數(shù)，以達(dá)到最佳效果。
　　使用后蓋好防塵罩。
　　出現(xiàn)技術(shù)故障時應(yīng)及時與廠家聯(lián)系，切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。

酶標(biāo)儀及洗板機選購指南
　　酶標(biāo)儀（Microplate Reader）是對酶聯(lián)免疫檢測（ EIA）實驗結(jié)果進行讀取和分析的專業(yè)儀器。酶聯(lián)免疫反應(yīng)通過偶聯(lián)在抗原或抗體上的酶催化顯色底物進行的，反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示，通過顯色的深淺即吸光度值的大小就可以判斷標(biāo)本中待測抗體或抗原的濃度。
　　酶標(biāo)儀廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中，特別在近幾年中，由于大量的酶聯(lián)免疫檢測試劑盒的應(yīng)用，使得酶標(biāo)儀在生殖保健領(lǐng)域中應(yīng)用越來越廣泛，同時促進了生殖健康技術(shù)水平提高 。
　　目前國內(nèi)許多計生站系統(tǒng)開展了酶免檢測項目，如：乙肝五項、愛滋病檢測、優(yōu)生優(yōu) 育系列檢測、激素檢測等。過去多數(shù)采用目測方法，報出的結(jié)果缺乏科學(xué)的依據(jù)。例如：某弓形蟲檢測試劑盒中，臨界值規(guī)定為：陰性對照品的 OD 值×2.5，通過目測無法判斷標(biāo)本孔的反應(yīng)顏色是否超過臨界值。肉眼進行兩孔之間的顏色比較可能還行，但比較一孔的顏色是否超過另一孔顏色的2.5倍就不可能。
　　國內(nèi)多家權(quán)威機構(gòu)，如衛(wèi)生部臨床檢驗中心和計劃生育系統(tǒng)等多次強調(diào)酶標(biāo)儀的重要性，并要求酶聯(lián)免疫檢測試劑應(yīng)使用酶標(biāo)儀判讀，酶免試劑的質(zhì)控也應(yīng)使用酶標(biāo)儀，并提供酶標(biāo)儀測定的原始數(shù)據(jù)，而各廠家的試劑盒說明書沒有是讓用目測的。同時酶免檢測的 項目往往是一些實質(zhì)性的感染和病變（如：肝炎、愛滋病、優(yōu)生優(yōu)育等），判讀更要求嚴(yán)謹(jǐn)，由誤診引起的糾紛很難處理。另外，住院手術(shù)病人術(shù)前的丙肝、愛滋等 EIA 試劑檢測是避免因輸血引起感染引發(fā)的醫(yī)療事故糾紛的必要手段，正逐漸被許多單位所采用。
　　我國免疫診斷方法主要有如下三種：酶免（EIA）、放免（RIA）和發(fā)光，在市場上的情況如下：
　　　　　　　　方法　　所處市場周期
　　　　　　　　放免　　衰退期
　　　　　　　　酶免　　成長期
　　　　　　　　發(fā)光　　進入期
　　放免技術(shù)由于試劑的污染和有效期等問題在國際和國內(nèi)市場逐漸被淘汰，而化學(xué)發(fā)光試劑和設(shè)備比較昂貴，使得其在國內(nèi)的普及特別在計生系統(tǒng)普及需要較長時間，EIA 技術(shù)穩(wěn)定，試劑價格合理，供應(yīng)充，酶免技術(shù)在中國市場處于成長期，因此購買酶標(biāo)儀正合適宜。
　　尤其要提到的是，在中國的計劃生育和婦幼保健系統(tǒng)配備酶標(biāo)儀已經(jīng)迫在眉睫。早在幾年以前, 世界衛(wèi)生組織已建議對孕婦進行 TORCH五項常規(guī)篩查，但是遺憾的是由于缺乏酶標(biāo)儀和洗板機等設(shè)備，RCH的檢測在中國還未能普遍開展。TORCH 感染在圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)中稱為TORCH綜合癥，由于孕婦, 胎兒和新生兒都易被感染, 它已受到全世界婦產(chǎn)科和兒科的極大重視。妊娠期感染不僅危害母體，往往還可對胎兒和新生兒產(chǎn)生嚴(yán)重影響。通過胎盤可引起子宮內(nèi)感染而導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎或胎兒生長遲緩和畸形，通過產(chǎn)道和母乳可引起新生兒感染。如累及神經(jīng)系統(tǒng)可造成不同程度的智力障礙以及各種癱瘓、失聰、失明等嚴(yán)重后遺癥，影響人口素質(zhì)，因而 TORCH 感染與優(yōu)生優(yōu)育有極為重要的關(guān)系。因此，RCH（IgG和gM）檢查通常也稱為優(yōu)生優(yōu)育十項檢查。目前，TORCH的檢測方法主要有放免（RIA）和酶免(EIA)。由于放免方法需要特殊儀器，且有放射危害，目前正被酶免（EIA）方法取代。EIA方法具有特異性強，靈敏度高，簡單快速，成本低等優(yōu)點，只要配備有酶標(biāo)儀和其他相應(yīng)的設(shè)備 ，多數(shù)普通實驗室均可方便地開展 。 很顯然, 盡快在計生系統(tǒng)普及酶標(biāo)儀等設(shè)備是一個迫切的需求。
　　這項工作的落實將有助于提高診治水平，降低母嬰發(fā)病率，從而提高整個國民的健康素質(zhì)。目前市場上提供的EIA試劑越來越多，如：T3、T4、TSH、TORCH 系列、不孕系列、各種癌癥標(biāo)志物、傷寒、副傷寒等，另外通過母嬰傳播的性傳播疾病(如淋病、梅毒、HIV)和肝炎（如HBV、HCV)，以及胎兒的抗體，新生兒TSH的測定，疫苗反應(yīng)等，市場上也都有成套 EIA 試劑盒供應(yīng)。使用酶標(biāo)儀有利于拓展檢測項目，提高檢測水平，其社會效益和 經(jīng)濟效益并舉。