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逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng) （Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR）
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逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time qPCR）
Real-time qPCR就是在PCR擴增過程中，通過熒光信號，對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數(shù)時期，模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，所以成為定量的依據(jù)。由于Real-time qPCR的眾多優(yōu)點，現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項重要技術(shù)，并成為基因表達差異和文章發(fā)表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測，很多沒有做過real-time qPCR的研究者常常感到高深莫測，不知從何入手；甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時候，盡管知曉qPCR的原理和基本操作，仍然浪費時間和精力，而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。
逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time qPCR） 服務(wù)流程
1、引物設(shè)計與合成
2、DNA/RNA抽提
3、反轉(zhuǎn)錄(針對RNA )
4、上機定量分析
結(jié)果展示
服務(wù)的優(yōu)勢
菩禾生物的real-time qPCR技術(shù)服務(wù)，根據(jù)實驗?zāi)康模O(shè)計實驗方案（相對定量或絕對定量；SYBR Green I或Taqman探針方法），用完全按照符合國際標準（MIQE）的real-time qPCR試劑完成實驗，提供符合文章發(fā)表的客觀事實實驗報告和原始數(shù)據(jù)。
實驗周期及交付標準
1.實驗周期: 1-2周
2.交付標準: 總RNA(或DNA)濃度，電泳圖片，擴增曲線，熔解曲線，Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析（可選），實驗報告以及剩余引物和模板（信諾金達可保存1個月）
需確認的信息
1需提供新鮮或保存完好的細胞（至少5×10^6）、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料；
2或純化好的總RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之間，完整性好）或總DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之間，完整性好）；
3或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl（反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好，純度在1.9-2.1之間）；
4同時提供待測基因序列或登錄號。
5樣本數(shù)量及分組信息
收費標準：
菩禾生物所有服務(wù)項目：
六、實驗服務(wù)流程
無錫菩禾生物是一家專業(yè)提供生物醫(yī)藥技術(shù)服務(wù)和細胞整體解決方案的高科技企業(yè)。擁有CMA 質(zhì)量體系認證的實驗室，5大技術(shù)平臺（細胞平臺、分子平臺、免疫平臺、病理平臺、動物平臺），以專業(yè)、嚴謹、求真、高效服務(wù)理念，為全國科研工作者提供一站式技術(shù)檢測服務(wù)。
公司地址：江蘇省江陰市砂山路85號
聯(lián)系方式：0510-81608116
Real-time qPCR就是在PCR擴增過程中，通過熒光信號，對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數(shù)時期，模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系，所以成為定量的依據(jù)。由于Real-time qPCR的眾多優(yōu)點，現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項重要技術(shù)，并成為基因表達差異和文章發(fā)表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測，很多沒有做過real-time qPCR的研究者常常感到高深莫測，不知從何入手；甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時候，盡管知曉qPCR的原理和基本操作，仍然浪費時間和精力，而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。
逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time qPCR） 服務(wù)流程
1、引物設(shè)計與合成
2、DNA/RNA抽提
3、反轉(zhuǎn)錄(針對RNA )
4、上機定量分析
結(jié)果展示
服務(wù)的優(yōu)勢
菩禾生物的real-time qPCR技術(shù)服務(wù)，根據(jù)實驗?zāi)康模O(shè)計實驗方案（相對定量或絕對定量；SYBR Green I或Taqman探針方法），用完全按照符合國際標準（MIQE）的real-time qPCR試劑完成實驗，提供符合文章發(fā)表的客觀事實實驗報告和原始數(shù)據(jù)。
實驗周期及交付標準
1.實驗周期: 1-2周
2.交付標準: 總RNA(或DNA)濃度，電泳圖片，擴增曲線，熔解曲線，Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析（可選），實驗報告以及剩余引物和模板（信諾金達可保存1個月）
需確認的信息
1需提供新鮮或保存完好的細胞（至少5×10^6）、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料；
2或純化好的總RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之間，完整性好）或總DNA（OD260/OD280在1.7-1.9之間，完整性好）；
3或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl（反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好，純度在1.9-2.1之間）；
4同時提供待測基因序列或登錄號。
5樣本數(shù)量及分組信息
收費標準：
菩禾生物所有服務(wù)項目：
| 細胞平臺 | 行為學(xué)檢測 | 動物模型 |
| 原代細胞制備與培養(yǎng) | 水迷宮檢測 | 慢性胰腺炎模型 |
| 細胞培養(yǎng)、傳代 | 十字架 | 肝纖維化模型 |
| 原代細胞傳代培養(yǎng) | 非酒精性脂肪肝 | |
| 細胞系STR鑒定服務(wù) | 動物模型 | 骨質(zhì)疏松模型 |
| 細胞轉(zhuǎn)染 | 小/大鼠飼養(yǎng) | 糖尿病模型 |
| MTT細胞增殖、活性、毒性檢測 | 小/大鼠灌胃 | 眼外傷模型 |
| CCK8細胞增殖、活性、毒性檢測 | 兔子飼養(yǎng)費 | 青光眼模型 |
| 流式細胞凋亡檢測 | 大鼠灌胃 | 燒燙傷模型 |
| 流式細胞周期檢測 | 小鼠灌胃 | 短腸模型 |
| 血管形成實驗（非鈣染/鈣染） | 兔子灌胃 | 腎衰模型 |
| ROS檢測 | 腹腔/肌肉給藥（大小鼠） | 腎炎模型 |
| 劃痕實驗 | 腹腔/肌肉給藥（兔子） | 尿路結(jié)石 |
| 克隆形成實驗 | 尿液/糞便采集 | 高氧/低氧損傷模型 |
| 粘附實驗 | 血液采集 | |
| transwell實驗（遷移） | TTC染色 | 病理平臺 |
| transwell實驗（侵襲） | 超聲檢測 | 組織包埋 |
| 貼壁/懸浮細胞轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建 | 血常規(guī)檢測 | 冰凍/石蠟切片 |
| 耐藥細胞株篩選構(gòu)建 | DR檢測 | HE染色 |
| 骨組織切片 | 其他特殊染色 | |
| 分子平臺 | microCT | 全掃描拍照 |
| 載體構(gòu)建 | 皮下瘤模型 | 掃描電鏡 |
| 細胞/組織/血液RNA提取 | 移植瘤模型 | 透射電鏡 |
| mRNA/miRNA等引物設(shè)計 | 原位瘤模型 | 共聚焦拍照 |
| RT-qPCR檢測 | 心肌缺血再灌注模型 | |
| CHIP檢測 | 門靜脈高壓動物模型 | |
| EMSA檢測 | 高血壓動物模型 | |
| 雙熒光素酶實驗 | 心肌梗死動物模型 | |
| 原位雜交 | 動脈粥樣硬化動物模型 | |
| 腦缺血再灌注 | ||
| 免疫平臺 | 腎性高血壓模型 | |
| 蛋白（核/膜/總）提取 | 主動脈弓狹窄模型 | |
| 蛋白含量測定 | 脊髓損傷模型 | |
| Western Blot檢測 | 背根神經(jīng)節(jié)損傷模型 | |
| COIP | 腦癱模型 | |
| 免疫組化/熒光 | 癲癇模型 | |
| 抑郁癥模型 | ||
| 行為學(xué)檢測 | 腎臟缺血再灌注模型 | |
| 水迷宮檢測 | 關(guān)節(jié)炎 | |
| 十字架 | 肺氣腫模型 |
六、實驗服務(wù)流程
無錫菩禾生物是一家專業(yè)提供生物醫(yī)藥技術(shù)服務(wù)和細胞整體解決方案的高科技企業(yè)。擁有CMA 質(zhì)量體系認證的實驗室，5大技術(shù)平臺（細胞平臺、分子平臺、免疫平臺、病理平臺、動物平臺），以專業(yè)、嚴謹、求真、高效服務(wù)理念，為全國科研工作者提供一站式技術(shù)檢測服務(wù)。
公司地址：江蘇省江陰市砂山路85號
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