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SNP位點檢測技術(shù)
基于雜交原理
服務(wù)類別:分子與細胞總訪問:2876
最后更新:2024-11-27半年訪問:72
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 SNP
單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphisms,SNPs),即指由于單個核苷酸堿基的改變而導(dǎo)致的核苷酸序列的多態(tài)性。

SNP檢測
主要是指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性檢測。與其他分子標(biāo)記相比,SNP分辨率最高也最為豐富,覆蓋基因組范圍大,遺傳上比較穩(wěn)定,在人類基因組中,估計平均每1000個堿基對就有1個SNP,估計其總數(shù)可達300萬個甚至更多,是繼微衛(wèi)星之后的第三代遺傳標(biāo)記。

技術(shù)原理

對一個SNP位點設(shè)計兩條探針,一條檢測野生型位點,一條檢測突變位點,每條探針從突變位點處分成左右兩個區(qū)段。兩條探針的左區(qū)段序列相同,右區(qū)段有兩點 不同,一是SNP位點,二是探針本身長度不同。檢測野生型位點的探針含有與該位點完全匹配的堿基,檢測突變型位點的探針含有與突變位點完全匹配的堿基。一 般檢測突變型位點的探針比野生型長。如果同時檢測多個位點就設(shè)計多對探針。

樣品要求
 DNA樣品 待檢測DNA樣品濃度要相對均一,DNA樣品濃度在10 ng/µl-50 ng/µl之間,體積>20μl,用雙蒸水或者TE緩沖液溶解,不含PCR抑制劑。務(wù)必注明樣品的準(zhǔn)確濃度。
客戶提供資料
詳細的SNP檢測位點及上下游各200個堿基的基因組DNA模板序,并注明在此范圍內(nèi)之所有其它SNP位點。

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