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基因敲除與基因敲除小鼠

基因敲除與基因敲除小鼠


knockout & knockout mouse
基因敲除,是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)基礎(chǔ)上的一種新分子生物學(xué)技術(shù)。
服務(wù)類別:轉(zhuǎn)基因總訪問:2146
最后更新:2014-2-18半年訪問:46
參考報(bào)價(jià):具體請(qǐng)聯(lián)系 010-56315318
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基因敲除與基因敲除小鼠
 
所謂“基因敲除小鼠、基因敲除模式小鼠“,就是先在小鼠的胚胎干細(xì)胞上通過基因重組的辦法進(jìn)行基因修飾——將胚胎干細(xì)胞中的靶向基因改掉,然后將“修飾”后的胚胎干細(xì)胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合體小鼠-基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠。這種嵌合體小鼠——基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠長(zhǎng)大后,體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。當(dāng)小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了,則它們就會(huì)生出基因完全被“修飾”過的基因敲除小鼠,基因敲除模式小鼠。

服務(wù)流程

A. 打靶載體構(gòu)建:(1-2個(gè)月)

包括:基因結(jié)構(gòu)分析、篩選策略設(shè)計(jì)、探針設(shè)計(jì)/構(gòu)建和證實(shí)、打靶載體構(gòu)建(體內(nèi)重組工程)、核實(shí)(同源臂、Neo原件盒、報(bào)告基因)、制備電轉(zhuǎn)用DNA;Southern雜交探針設(shè)計(jì)和優(yōu)化。

B. ES細(xì)胞培養(yǎng)和電轉(zhuǎn)(2-3周)

   包括ES細(xì)胞的培養(yǎng)和將打靶載體電轉(zhuǎn)進(jìn)ES細(xì)胞。

C. 陽(yáng)性克隆的分離和篩選(3-5周)

包括通過PCRsouthern雜交對(duì)抗生素抗性ES細(xì)胞和陽(yáng)性ES細(xì)胞的篩選。

D. 陽(yáng)性ES細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)和顯微注射(2-3個(gè)月)

   包括將陽(yáng)性ES細(xì)胞顯微注射/轉(zhuǎn)移到囊胚中,將囊胚植入代孕母鼠,以及嵌合體小鼠的出生

E.  繁殖嵌合體小鼠并得到F1代小鼠,通過基因型檢測(cè)確認(rèn)得到雜合子(2-3 月) 。

F. 運(yùn)輸所有課題相關(guān)材料,包括一籠(不少于2只)F1雜合子小鼠和所有陽(yáng)性重組胚胎干細(xì)胞(1-2月)。

需要您提供的信息

您只需告訴我們基因名字和您的特殊要求。如果您沒有相關(guān)的經(jīng)驗(yàn),我們會(huì)免費(fèi)為您提供咨詢,根據(jù)您的需求為您提供最佳的設(shè)計(jì)方案。

我們給您的終產(chǎn)品

不少于兩只的F1雜合子小鼠以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。我們會(huì)提供給您相關(guān)的檢測(cè)方法和最終檢測(cè)報(bào)告,您也可以自己進(jìn)行核實(shí)檢測(cè),也可以在我們的幫助之下完成。

服務(wù)說明

在您的課題進(jìn)行過程中,我們會(huì)每?jī)蓚(gè)周為您發(fā)送一次課題進(jìn)展匯報(bào),內(nèi)容包括課題進(jìn)展的每一步結(jié)果(包括電泳圖、PCR結(jié)果、酶切結(jié)果和雜交結(jié)果等),讓您清楚的了解自己課題的進(jìn)展情況,就如同自己的學(xué)生在做lab meeting 一樣。

 

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