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基因嵌入(Knockin)是根據(jù)實驗要求,在目的基因位置引進(jìn)特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點突變(模擬人類遺傳疾病模型)
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服務(wù)商: 北京百奧賽圖基因生物技術(shù)有限公司 | 查看該公司所有服務(wù) >> |
基因嵌入是根據(jù)實驗要求,在目的基因位置引進(jìn)特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點突變;或?qū)蟾婊蛲ㄟ^同源重組的方式引入目的基因的特定位點,從而可以通過報告基因的表達(dá)跟蹤目標(biāo)基因的表達(dá)。
服務(wù)流程
A. 打靶載體構(gòu)建:(1-2個月)
基因結(jié)構(gòu)分析、篩選策略設(shè)計、探針設(shè)計/構(gòu)建和證實、打靶載體構(gòu)建(體內(nèi)重組工程)、核實(同源臂、Neo原件盒、報告基因)、制備電轉(zhuǎn)用DNA;Southern雜交探針設(shè)計和優(yōu)化。
ES細(xì)胞培養(yǎng)和電轉(zhuǎn)(2-3周)
包括ES細(xì)胞的培養(yǎng)和將打靶載體電轉(zhuǎn)進(jìn)ES細(xì)胞。
陽性克隆的分離和篩選(3-5周)
D. 陽性ES細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)和顯微注射(2-3個月)
包括將陽性ES細(xì)胞顯微注射/轉(zhuǎn)移到囊胚中,將囊胚植入代孕母鼠,以及嵌合體小鼠的出生
E. 繁殖嵌合體小鼠并得到F1代小鼠,通過基因型檢測確認(rèn)得到雜合子(2-3 月) 。
F. 運(yùn)輸所有課題相關(guān)材料,包括一籠(不少于2只)F1雜合子小鼠和所有陽性重組胚胎干細(xì)胞(1-2月)。
需要您提供的信息
您只需告訴我們基因名字和您的特殊要求。如果您沒有相關(guān)的經(jīng)驗,我們會免費(fèi)為您提供咨詢,根據(jù)您的需求為您提供最佳的設(shè)計方案。
我們給您的終產(chǎn)品
不少于兩只的F1雜合子小鼠以及相關(guān)實驗數(shù)據(jù)。我們會提供給您相關(guān)的檢測方法和最終檢測報告,您也可以自己進(jìn)行核實檢測,也可以在我們的幫助之下完成。
服務(wù)說明
在您的課題進(jìn)行過程中,我們會每兩個周為您發(fā)送一次課題進(jìn)展匯報,內(nèi)容包括課題進(jìn)展的每一步結(jié)果(包括電泳圖、PCR結(jié)果、酶切結(jié)果和雜交結(jié)果等),讓您清楚的了解自己課題的進(jìn)展情況,就如同自己的學(xué)生在做lab meeting 一樣。