2019年3月15日，國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心（北京）研究員、課題組長裴華東博士及其研究團(tuán)隊在國際多學(xué)科綜合性期刊、Nature子刊《Nature Communications》（自然-通訊，IF=12.353）上發(fā)表了研究成果The deubiquitylating enzyme USP15 regulates homologous recombination repair and cancer cell response to PARP inhibitors（DOI "10.1038/s41467-019-09232-8”）。

本篇研究背景：如果乳腺癌和卵巢癌患者的癌細(xì)胞出現(xiàn)了由于 BRCA1/2 基因突變導(dǎo)致的同源重組缺陷，多聚ADP-核糖聚合酶抑制劑 PARPi 就能夠選擇性的對這類癌細(xì)胞起到良好的殺滅作用。但在臨床中也出現(xiàn)了使用 PARPi 殺滅無 BRCA1/2 基因突變的癌細(xì)胞的案例，所以這一內(nèi)在作用機(jī)理并不是很清楚。

研究發(fā)現(xiàn)，去泛素化酶 USP15 通過調(diào)控同源重組過程，影響了癌細(xì)胞對 PARPi 產(chǎn)生的反應(yīng)。USP15 通過與 MDC1 蛋白反應(yīng)，定位到 DNA 雙鏈斷裂位點，然后在 BARD1 的 BRCT 結(jié)構(gòu)域引起去泛素化反應(yīng)，并激活 BARD1-HP1γ 的互作，致使 BRCA1/BARD1 在 DNA 雙鏈斷裂位點停留，使同源重組順利發(fā)生。USP15 基因敲除小鼠表現(xiàn)出的基因不穩(wěn)定，也是 USP15 參與同源重組調(diào)控的另一證據(jù)。由癌癥引發(fā)的 USP15 基因突變致使其與 BARD1 的反應(yīng)效能降低，即會增加癌細(xì)胞對 PARPi 的敏感性。以上研究表明 SP15是 一個全新的同源重組調(diào)控因子，該分子作為潛在的生物標(biāo)記物，對于癌癥病例個體能否適用 PARPi 類抗癌藥治療的判斷具有重要價值。

莫納生物的三代逆轉(zhuǎn)錄和抗體法 qPCR mix 兩款產(chǎn)品有幸助力此項研究。

產(chǎn)品特點

▪ MonAmp™ SYBR® Green qPCR Mix (Low Rox) 是基于抗體修飾的熱啟動 Taq DNA 聚合酶開發(fā)的實時定量 PCR 用2× 預(yù)混液。本品包含了除引物和樣品DNA以外所有的定量 PCR 組分，可減少操作步驟，縮短加樣時間，降低了污染幾率，適用于以 cDNA 或 DNA 為樣品的 SYBR® Green I 摻入法檢測。

莫納提供預(yù)混不同濃度 Rox 的抗體熱啟動 qPCR Mix，完美兼容市面常見品牌的定量 PCR 儀。

▪ MonScript™ RTIII All-in-One Mix (with dsDNase) 是針對一鏈 cDNA 合成開發(fā)出的一個操作更為簡便的系統(tǒng)，包含所有一鏈 cDNA 合成反應(yīng)所需組分，反應(yīng)中僅需加入 RNA 模板和水。預(yù)混液中的逆轉(zhuǎn)錄酶是MonScript™ RTase III（REF: RN05002），該酶去除了 RNase H活性，最高反應(yīng)溫度為 55℃，大幅提升了逆轉(zhuǎn)錄效率和對復(fù)雜模板（高 GC 比例或大量二級結(jié)構(gòu)）的耐受性，特異性更好、產(chǎn)率更高、更容易獲得全長 cDNA。該試劑盒中包含了dsDNase，能夠徹底去除基因組 DNA 污染，保證下游定量結(jié)果的真實可靠。