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OriCell第三屆細(xì)胞培養(yǎng)圖片大賽開(kāi)始投票啦，感謝各位科研鏟屎官的熱情參與以及經(jīng)驗(yàn)分享！不論是漂亮組還是悲催組，小編都感受到了大家培養(yǎng)細(xì)胞的不易以及積極樂(lè)觀的心態(tài)，接下來(lái)就讓我們一起學(xué)習(xí)下部分小伙伴總結(jié)的成功或者失敗經(jīng)驗(yàn)吧：

來(lái)自投稿小伙伴們的經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)

01

姓名：孫鑫

作品名稱：百變心肌boy

作品描述：該細(xì)胞為新生乳大鼠原代心肌細(xì)胞α-actin染色，心肌細(xì)胞在體外也無(wú)法增殖，每次分離的心肌細(xì)胞無(wú)法擴(kuò)增與凍存，需要現(xiàn)取現(xiàn)用。原代心肌細(xì)胞可以伸展呈現(xiàn)多種細(xì)胞形態(tài)，在不同條件刺激下，心肌細(xì)胞表面積會(huì)發(fā)生變化，比正常心肌細(xì)胞更大，所以心肌細(xì)胞α-actin染色常用于心肌肥厚研究中。原代心肌細(xì)胞分離技術(shù)可作為研究心臟疾病實(shí)驗(yàn)中的看家本領(lǐng)，是由于心肌細(xì)胞存活率較低，稍有不慎即可全軍覆沒(méi)，所以實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)小心謹(jǐn)慎動(dòng)作輕柔。我們通過(guò)將原代心肌細(xì)胞接種在細(xì)胞爬片上，應(yīng)用免疫熒光技術(shù)，在共聚焦顯微鏡下拍照，圖中心肌細(xì)胞肌節(jié)清晰可見(jiàn)，同時(shí)心肌細(xì)胞有不同的形態(tài)，甚是美觀。

02

姓名：潘威

作品名稱：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞

作品描述：此圖為第4代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（hUC-MSCs），放大40倍，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭型。從臍帶提取原代MSC說(shuō)起來(lái)就是一把辛酸淚（或許我該參加悲催組），用組織塊貼壁法第一次提等了足足半個(gè)月一個(gè)細(xì)胞沒(méi)見(jiàn)著，第二次通宵搞了二十皿，一周后終于看到個(gè)別組織塊周?chē)�有�?xì)胞爬出來(lái)了，簡(jiǎn)直要感動(dòng)哭了。要說(shuō)經(jīng)驗(yàn)的話感覺(jué)組織塊的處理是關(guān)鍵，盡量切成邊緣整齊的1mm³有厚度的小塊，鋪板之前加PBS洗一次，不然會(huì)皿底很“臟”，皿用培養(yǎng)基預(yù)先浸潤(rùn)，鋪上組織塊后倒置30~60min再加適量培養(yǎng)基剛剛沒(méi)過(guò)組織塊就好，鋪板之后放在培養(yǎng)箱一個(gè)周一下都不要?jiǎng)樱�組織塊飄了肯定是收不到細(xì)胞的！提一次不容易，大家可以把活力強(qiáng)的組織塊挑出來(lái)復(fù)種，還可以爬出來(lái)細(xì)胞的，我最多的復(fù)種了四次，每次爬出來(lái)的都計(jì)為P0。

作品名稱：人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化

作品描述：如圖所示為第4代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化（茜素紅染色），放大40倍和100倍，誘導(dǎo)35天。用的是OriCell人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基試劑盒（HUXUC-90021），按說(shuō)明書(shū)步驟做就好，先用明膠包被六孔板，融合度70%左右是加誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基開(kāi)始培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)盡量不要?jiǎng)铀�，每三天換液，出現(xiàn)鈣結(jié)節(jié)的時(shí)候改為每?jī)商彀肓繐Q液（20天左右）。培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)看到細(xì)胞層“卷邊”像染菌一樣，淡定莫慌正常現(xiàn)象，換液時(shí)輕柔力度小一些就好，最初我也不知道“鈣結(jié)節(jié)”長(zhǎng)什么模樣，多了之后顯微鏡下一團(tuán)團(tuán)黃色有點(diǎn)亮晶晶的東東就是了。當(dāng)加上染液紅色暈染開(kāi)來(lái)的時(shí)候，我知道我這一個(gè)多月沒(méi)有白等，值了。

03

姓名：郭佳

作品名稱：hiPSC

作品描述：圖為人源性多潛能干細(xì)胞（hiPSC），培養(yǎng)人多潛能干細(xì)胞誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞大概需要40天，圖為剛復(fù)蘇培養(yǎng)了10天的干細(xì)胞，培養(yǎng)此類細(xì)胞耗費(fèi)的時(shí)間較長(zhǎng)，細(xì)胞需要抱團(tuán)生存，消化的力度需要掌握好，消化后達(dá)到3，4個(gè)細(xì)胞抱團(tuán)的效果最好，在孔板中，不能等到細(xì)胞占滿孔板再傳代，長(zhǎng)的好時(shí)，大概每天換液，隔天傳代。

04

姓名：木子

作品名稱：神經(jīng)球染色鑒定

作品描述：此圖為鼠源神經(jīng)干細(xì)胞P1分離自E14.5的胎鼠皮層，培養(yǎng)3天后固定染色。圖為600×，紅色為sox2，綠色為nestin，均為神經(jīng)干細(xì)胞的標(biāo)志物。說(shuō)明我們分離純化得到的細(xì)胞是神經(jīng)干細(xì)胞或神經(jīng)前體細(xì)胞。染出并利用confcol拍出好看的圖的秘訣是，自小鼠體內(nèi)分離P1細(xì)胞后，培養(yǎng)天數(shù)不宜過(guò)久，2.5-3天為宜，此時(shí)神經(jīng)球形態(tài)較好，呈圓型，且直徑不大，剛適合拍照。

05

姓名：實(shí)驗(yàn)小白

作品名稱：細(xì)胞你怎么又雙叒叕染菌啦？

作品描述：即將用于劃痕實(shí)驗(yàn)的HUVEC...用含10％血清+1％雙抗的DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，好不容易等到它長(zhǎng)滿了，結(jié)果準(zhǔn)備劃痕的時(shí)候發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁，而且培養(yǎng)基表面有白色絲帶狀物質(zhì)，顯微鏡下一看果然染菌了，而且密度還非常大，害太難受了！總結(jié)原因可能是直接接6孔板的時(shí)候沒(méi)有做的規(guī)范操作，同時(shí)沒(méi)有經(jīng)常去看細(xì)胞狀態(tài)，等發(fā)現(xiàn)的時(shí)候已經(jīng)來(lái)不及了！

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