利用轉(zhuǎn)輪研究動(dòng)物的晝夜節(jié)律主要分為如下幾個(gè)部分:
一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
選擇合適的動(dòng)物:通常選用小鼠、大鼠等模式動(dòng)物,它們具有明顯的晝夜活動(dòng)節(jié)律,且易于在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中飼養(yǎng)和觀察。
準(zhǔn)備轉(zhuǎn)輪裝置:確保轉(zhuǎn)輪大小適合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,轉(zhuǎn)動(dòng)靈活,且配備精確的記錄系統(tǒng),能夠準(zhǔn)確記錄轉(zhuǎn)輪的轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)、時(shí)間等數(shù)據(jù)。將轉(zhuǎn)輪安裝在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)籠內(nèi),保證動(dòng)物能夠自由進(jìn)出轉(zhuǎn)輪。
設(shè)置實(shí)驗(yàn)環(huán)境:將飼養(yǎng)籠放置在光線、溫度、濕度等環(huán)境條件可控的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。設(shè)定固定的光照周期,如 12 小時(shí)光照、12 消時(shí)黑暗,模擬自然晝夜環(huán)境,并保持溫度在 22 - 25℃,濕度在 40% - 60%,以提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)條件。
二、實(shí)驗(yàn)過(guò)程
適應(yīng)期:在正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,讓動(dòng)物在轉(zhuǎn)輪環(huán)境中適應(yīng) 3 - 7 天,使它們熟悉轉(zhuǎn)輪和周圍環(huán)境,減少應(yīng)激反應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。在此期間,正常提供食物和水,讓動(dòng)物自由活動(dòng)。
數(shù)據(jù)采集期:適應(yīng)期結(jié)束后,開(kāi)始正式記錄數(shù)據(jù)。持續(xù)記錄動(dòng)物在轉(zhuǎn)輪中的活動(dòng)情況,一般以天為單位,記錄多個(gè)連續(xù)的晝夜周期。記錄內(nèi)容包括轉(zhuǎn)輪每次轉(zhuǎn)動(dòng)的時(shí)間、轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)等信息,通過(guò)這些數(shù)據(jù)可以分析動(dòng)物在不同時(shí)間段的活動(dòng)強(qiáng)度和頻率。
改變實(shí)驗(yàn)條件(可選):在完成基礎(chǔ)數(shù)據(jù)采集后,可以根據(jù)研究目的改變一些實(shí)驗(yàn)條件,如調(diào)整光照時(shí)間、改變溫度等,觀察動(dòng)物在轉(zhuǎn)輪中的活動(dòng)節(jié)律如何隨環(huán)境變化而改變。例如,將光照時(shí)間延長(zhǎng)或縮短,觀察動(dòng)物的活動(dòng)高峰是否會(huì)相應(yīng)地提前或推遲。
三、數(shù)據(jù)分析
繪制活動(dòng)曲線:根據(jù)記錄的數(shù)據(jù),以時(shí)間為橫軸,轉(zhuǎn)輪轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)或活動(dòng)時(shí)間為縱軸,繪制動(dòng)物的活動(dòng)曲線。通過(guò)活動(dòng)曲線可以直觀地觀察到動(dòng)物在晝夜不同時(shí)間段的活動(dòng)情況,確定其活動(dòng)高峰和低谷出現(xiàn)的時(shí)間。
計(jì)算節(jié)律參數(shù):利用專門的數(shù)據(jù)分析軟件或統(tǒng)計(jì)方法,計(jì)算動(dòng)物活動(dòng)的節(jié)律參數(shù),如晝夜活動(dòng)周期、活動(dòng)振幅(即活動(dòng)高峰與低谷之間的差值)、活動(dòng)相位(即活動(dòng)高峰相對(duì)于光照 - 黑暗周期的時(shí)間位置)等。這些參數(shù)可以定量地描述動(dòng)物的晝夜節(jié)律特征。
比較不同組別的差異:如果設(shè)置了不同的實(shí)驗(yàn)條件或有多個(gè)實(shí)驗(yàn)組,通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法(如方差分析、t 檢驗(yàn)等)比較各組之間節(jié)律參數(shù)的差異,以確定不同因素對(duì)動(dòng)物晝夜節(jié)律的影響。例如,比較正常光照組和光照改變組動(dòng)物的活動(dòng)周期、活動(dòng)相位等參數(shù),判斷光照變化是否對(duì)動(dòng)物的晝夜節(jié)律產(chǎn)生了顯著影響。