生物體暴露在不同的溫度條件下會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞功能的改變和負(fù)責(zé)減輕細(xì)胞損傷的基因的表達(dá)。熱休克應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制在細(xì)菌、植物和動(dòng)物中是保守的,包括所謂的熱休克蛋白的表達(dá)。
秀麗隱桿線蟲已經(jīng)成為研究生理和細(xì)胞對(duì)熱應(yīng)激反應(yīng)及其與病理和衰老關(guān)系的一個(gè)非常有用的模型。使用WMicrotracker ARENA系統(tǒng),可以實(shí)時(shí)研究對(duì)壓力的行為反應(yīng)動(dòng)力學(xué),并測(cè)量新的小分子、基因或天然化合物的效果。這里有一個(gè)測(cè)量的例子…
熱應(yīng)力下行為變化的動(dòng)力學(xué):
在本實(shí)驗(yàn)中,我們可以觀察到蟲群在溫度脅迫下的行為動(dòng)態(tài)效應(yīng),在L3幼蟲和3齡成蟲中可觀察到不同的反應(yīng)。
方法:
(1)在20°C的NGM + OP50中獲得同步蟲群。(2)用緩沖液從培養(yǎng)皿中收集蠕蟲。(3)在10ul體積內(nèi)數(shù)蠕蟲數(shù),調(diào)整體積,使其濃度為50蠕蟲/ 20ul;(4) 按每孔20μl蟲液轉(zhuǎn)移至含無菌NGM的6孔微孔板。(5)使用WMicrotracker ARENA記錄有蟲板的活動(dòng),溫度設(shè)置為:22℃時(shí)30m, 37℃時(shí)90m, 22℃時(shí)360m。(6)使用MSExcel生成數(shù)據(jù)報(bào)告和繪圖。
WMicrotracker小動(dòng)物活動(dòng)力分析系統(tǒng),為測(cè)試培養(yǎng)于液體中的小模式動(dòng)物而優(yōu)化設(shè)計(jì),在24、48、96或384孔板中自動(dòng)量化小模式動(dòng)物的行為活動(dòng)。已成功證明了可應(yīng)用于例如線蟲(C.elegans)、斑馬魚幼蟲(Zebrafish larvae)和其它昆蟲幼蟲(insects larvae),應(yīng)用于化合物篩選、RNAi/嗎=啉試驗(yàn)、轉(zhuǎn)基因試驗(yàn)、長周期測(cè)試或自定義實(shí)驗(yàn);毒性測(cè)試、麻痹試驗(yàn)、代謝試驗(yàn)、疾病模型、突觸調(diào)節(jié)器、抗逆性、健康期(衰老)、趨化性、卵孵化等實(shí)驗(yàn)。
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