【臺式透射電鏡】如何解讀生物組織 TEM 超微結構？精準醫(yī)學研究院電鏡平臺專家實例分享

​近期飛納臺式場發(fā)射掃描透射電子顯微鏡 Phenom Pharos G2 STEM 在上海精準醫(yī)學研究院（以下簡稱精準院）電鏡平臺成功落戶，完成裝機驗收。

精準院電鏡中心成立于 2017 年 11 月。配備有 3 臺高端冷凍透射電鏡（cryo-TEM）。其中包括 FEI 公司場發(fā)射低溫透射電鏡家族的旗艦產品 Titan Krios G3，配備有場發(fā)射電子槍以及先進的直接電子檢測相機 Gatan K3。該電鏡是強大的冷凍透射電鏡之一，具有在接近原子分辨率下解析蛋白質三維結構的能力。

精準院此次引進飛納臺式透射電鏡Phenom Pharos G2 STEM 旨在加強生物組織超微表征的靈活勝任能力。Phenom Pharos G2 STEM  為桌面式設計，操作簡單，抽真空時間僅需 15 秒，測試效率高。適合課題組進行大規(guī)模樣品篩選，染色檢查，鑲嵌塊位置篩選。在很多情況下，其高分辨率照片也可以直接用于文章發(fā)表。

經(jīng)過授權，精準院梁雅坤老師以心肌組織超薄切片為例，為我們解讀如何對生物組織 TEM 進行超微結構解讀。（備注：以下圖片均來自精準院授權，盜版必究）

臺式透射電鏡 Pharos STEM
血管、血管內皮細胞、紅細胞超微結構
 

圖1（圖片來自精準院授權，盜版必究）
 

• 血管:在 TEM 圖像中，血管可能呈現(xiàn)為圍繞著一個或多個較大空間的結構，這些空間被稱為血管腔。血管壁可能由一層或多層細胞構成，具體取決于是動脈、靜脈還是毛細血管。在這張圖片中，可以看到血管壁為圍繞空腔的較暗色的區(qū)域。

• 血管內皮細胞: 血管的內層是由血管內皮細胞組成的，它們通常是扁平的細胞，緊密排列在血管的內表面。在 TEM 圖像中，這些細胞可能顯示為薄的、貼著血管腔的暗色線條。

• 紅細胞: 紅細胞在 TEM 圖像中通常呈圓形或輕微壓扁的雙凹形狀，且沒有細胞核。在血管內，它們可能出現(xiàn)為位于血管腔內的小圓形或橢圓形暗色物體。

Pharos STEM 臺式透射電鏡
心肌細胞內的：心肌纖維、線粒體、脂肪超微結構

圖2（圖片來自精準院授權，盜版必究）
 

• 心肌纖維: 心肌纖維在電子顯微鏡圖像中可能呈現(xiàn)為具有交錯條紋的長條形結構，這些條紋代表心肌細胞內的肌纖維。心肌細胞內也可能有明顯的線粒體和細胞核。

• 線粒體: 線粒體在TEM圖像中是較小的暗色結構，具有特征性的內膜折疊（嵴）。它們通常出現(xiàn)在心肌纖維內，但也可以在其他細胞類型中找到。

• 脂肪: 脂肪在TEM圖像中通常表現(xiàn)為一塊空白區(qū)域，因為脂肪通常不易被染色，襯度偏亮。這些區(qū)域周圍可能有細膜包裹。
   

以上結果拍攝自飛納臺式場發(fā)射掃描透射電子顯微鏡  Phenom Pharos G2 STEM，可實現(xiàn)分辨率達  1nm 的高襯度成像。通過 STEM 掃描透射探測器，獲得明場、暗場、HAADF 成像模式，觀察樹脂包埋樣品超薄切片中的細胞內結構、細胞器或病毒，或對分散到銅網(wǎng)上的外泌體樣品進行直接表征。STEM 掃描透射模式可以輕松獲得大視野范圍成像，擺脫傳統(tǒng)低壓透射視野范圍的限制，以更便捷的方式搜尋感興趣區(qū)域（Field of Interest）。