熒光western Blot：選擇可見(jiàn)熒光檢測(cè)還是紅外檢測(cè)？

熒光檢測(cè)的主要優(yōu)勢(shì)之一是可以進(jìn)行多重檢測(cè)（2種甚至更多種蛋白）。當(dāng)前的實(shí)驗(yàn)技術(shù)允許使用近紅外檢測(cè)兩種蛋白也可以使用三色RGB可見(jiàn)熒光檢測(cè)三種蛋白。

近紅外檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)

同時(shí)檢測(cè)三種蛋白要比兩種好，為什么我們還要選擇紅外成像呢？

紅外熒光檢測(cè)印跡膜上的靶標(biāo)蛋白是行之有效的western blot方法，特別是在探測(cè)低豐度蛋白的微弱信號(hào)時(shí)，近紅外檢測(cè)是最好的選擇。NC（硝酸纖維素）膜存在自發(fā)熒光，紅外區(qū)背景噪音相比于可見(jiàn)熒光區(qū)低很多，信噪比更高，更容易檢測(cè)到靶標(biāo)蛋白。

激光-紅外western

Azure c系列成像系統(tǒng)采用激光光源激發(fā)，發(fā)射光更接近染料的最大發(fā)射波長(zhǎng)680nm和800nm，二抗產(chǎn)生的信號(hào)更高。

可見(jiàn)熒光檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)

當(dāng)需要同時(shí)檢測(cè)三個(gè)蛋白時(shí)，可見(jiàn)熒光顯然是最佳的選擇。可見(jiàn)熒光具備很好的靈活性，有多種可見(jiàn)熒光染料可供選擇。如果您正在使用可見(jiàn)熒光染料（發(fā)射光譜可被區(qū)分）進(jìn)行其它實(shí)驗(yàn)，很容易將這些染料應(yīng)用于Western blot實(shí)驗(yàn)中。

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