PCR Array FAQ:

1. 任何一臺(tái)能夠做QPCR的儀器據(jù)能夠做PCRarray嗎？
2. QPCR 儀器都可以進(jìn)行QPCR array的實(shí)驗(yàn)。
3. 根據(jù)儀器采用的96孔或者384孔板，分為以下5種板型（plate format）：

BioTNT PCR array的適用在哪里？

回答：適用現(xiàn)有的通路研究；

適用少樣本或中等樣本，多基因的QPCR 檢測(cè)；

在低樣本或中等樣本的情況下，費(fèi)用和時(shí)間遠(yuǎn)小于自行建立QPCR實(shí)驗(yàn)；

使用方便，操作簡(jiǎn)單，結(jié)果穩(wěn)定性好；

BioTNT PCR array的優(yōu)點(diǎn)是什么？

 Ct值的平均差異只有0.25個(gè)循環(huán)；

數(shù)據(jù)分析方便：專用軟件方便數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

從QPCR 得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)后，如何進(jìn)行后續(xù)的結(jié)果分析？需要配套的儀器設(shè)備嗎？

回答： 您可以用這個(gè)鏈接，http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

點(diǎn)擊分析工具，然后再點(diǎn)擊：分析軟件下載下載后進(jìn)行分析。不需要特殊的分析儀器。

BioTNT 的PCR array，如果自己使用，需要購(gòu)買哪些配套產(chǎn)品？

http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx

PCR array 產(chǎn)品之外，您應(yīng)購(gòu)買以下產(chǎn)品，對(duì)PCR array進(jìn)行配套使用：

PCR array cDNA第一鏈合成試劑盒 A2010B0B03  
Real time 染料PCR PreMIX A2010A0112
建議使用高品質(zhì)的抽提試劑盒，推薦型號(hào)為：

RNase-Free DNase Set (50)，79254 

如果使用其他公司的抽提試劑盒，如Trizol 法抽提試劑盒，能否使用BioTNT的PCR array 產(chǎn)品？

DNA 去除；使用PCR array 產(chǎn)品前，先進(jìn)行樣本質(zhì)量的驗(yàn)證。能夠通過(guò)樣本質(zhì)量驗(yàn)證的樣本，可以進(jìn)行PCR array實(shí)驗(yàn)。

如何進(jìn)行PCR array 實(shí)驗(yàn)前的樣本質(zhì)量驗(yàn)證？

PCR array實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量，建議在使用前先進(jìn)行樣本質(zhì)量驗(yàn)證；

定量與質(zhì)量控制

使用無(wú)菌水(RNase-free)稀釋 RNA 樣本，檢測(cè) 260  nm 和 280  nm 吸光值，A260/280 應(yīng)大于 1.8。

使用公式A260× 40 ×稀釋倍數(shù)  = XXXXμg/mL 計(jì)算 RNA 濃度。

使用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè) RNA 完整性。

建議：RNA 質(zhì)量測(cè)定后，逆轉(zhuǎn)錄得到CDNA，建議用多個(gè)內(nèi)參基因自行驗(yàn)證CDNA 質(zhì)量；

biotnt 的樣本質(zhì)量驗(yàn)證引物套裝，可以在進(jìn)行QPCR 之前對(duì)樣本進(jìn)行驗(yàn)證(包含內(nèi)參引物，如human beta actin， GAPDH,  18sRNA等)

基因組DNA污染控制

Array板塊上的GDC(Genomic  DNA  Control)反應(yīng)孔專為檢測(cè)每個(gè)樣品進(jìn)行qPCR反應(yīng)時(shí)可能存在的基因組DNA污染而設(shè)置。如果該反應(yīng)孔的CT值小于35，則表明存在可檢測(cè)到的基因組DNA污染，應(yīng)采取措施予以解決。因此，必須從RNA樣品中去除基因組和其他全部殘余污染物。建議采用Qiagen 柱式抽提過(guò)程中加入DNAse去除基因組污染。

PCR array 之前購(gòu)買BioTNT 樣本質(zhì)量驗(yàn)證引物套裝或者單獨(dú)的GDC 引物進(jìn)行基因組DNA 污染控制的質(zhì)量驗(yàn)證；驗(yàn)證結(jié)果CT 值如果小于35，則表明存在可檢測(cè)到的基因組DNA污染，應(yīng)采取措施予以解決。

如何進(jìn)行樣本的調(diào)平？

PCR array之前，對(duì)樣本需要進(jìn)行調(diào)平。具體調(diào)平方式為：  

RNA 含量調(diào)平：實(shí)驗(yàn)樣本的RNA 盡量調(diào)到同一水平；加入RNA 酶free的水，調(diào)整RNA 濃度；

調(diào)平后的樣本：通過(guò)內(nèi)參引物進(jìn)行驗(yàn)證，根據(jù)CT 值，進(jìn)行二次調(diào)平。

BioTNT PCR array定制費(fèi)用如何？

BioTNT PCR array 提供您的定制，僅比預(yù)制產(chǎn)品增加了400元/板的定制費(fèi)用。您可以把您要檢測(cè)的指標(biāo)給我們，然后把您的儀器型號(hào)，以及sample 數(shù)量，重復(fù)數(shù)量提供給我們，我們?yōu)槟�設(shè)置相應(yīng)的PCR array 形式，并核算相應(yīng)的費(fèi)用給您。

BioTNT PCR array的定制，方式靈活，1 plate起訂。

http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx，點(diǎn)擊定制服務(wù)。

如果我沒(méi)有QPCR 儀器，BioTNT 能夠提供什么服務(wù)？

BioTNT PCR array service。

 http://www.biotnt.com/product/PCR-Array.aspx，點(diǎn)擊service。