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動(dòng)物組織樣本處理的注意事項(xiàng)和方法

瀏覽次數(shù):1483 發(fā)布日期:2024-5-8  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
動(dòng)物組織基因組DNA提取是分子生物學(xué)和遺傳學(xué)研究的關(guān)鍵步驟之一。下面是一些關(guān)于樣本處理的注意事項(xiàng)及方法,以確保提取到高質(zhì)量和純度的DNA。
 

注意事項(xiàng):
1. 樣本收集:在收集動(dòng)物組織樣本時(shí),應(yīng)注意防止樣本受到污染。最好使用無(wú)菌操作,并使用無(wú)菌工具采集樣本。
2. 樣本處理:樣本處理前應(yīng)將所有工作臺(tái)面和儀器消毒,以避免外源核酸污染。同時(shí)保持操作環(huán)境干凈整潔。
3. 樣本保存:為避免DNA降解,可將樣本冷凍保存在-20°C的冰箱內(nèi)。避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在室溫下,防止核酸酶和細(xì)菌的污染。

方法:
1. 細(xì)胞破碎:將動(dòng)物組織樣本切割成小塊或使用細(xì)胞破碎緩沖液將其破碎,以釋放細(xì)胞內(nèi)的DNA。可選擇機(jī)械破碎、酶消化或凍融等方法。
2. 蛋白質(zhì)沉淀:加入酚/氯仿混合液,使DNA分離到上層水相。通過(guò)離心分離DNA上層的水相,并丟棄蛋白質(zhì)底層。
3. DNA沉淀:將上層水相轉(zhuǎn)移至新的離心管中,加入等體積的異丙醇,并輕輕搖晃混勻,使DNA沉淀。通過(guò)離心沉淀DNA,并丟棄上清液。
4. 洗滌和純化:使用70%乙醇洗滌DNA沉淀,去除殘留的鹽和雜質(zhì)。然后使用TE緩沖液溶解DNA,以獲得純凈且穩(wěn)定的DNA樣品。
5. 檢測(cè)DNA質(zhì)量:使用分光光度計(jì)或凝膠電泳等方法檢測(cè)提取到的DNA質(zhì)量和濃度,確保其適用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)分析。

上海領(lǐng)駿生物科技有限公司成立于2016年,位于上海市青浦區(qū)張江云立方園區(qū)。公司長(zhǎng)期致力于生物領(lǐng)域內(nèi)相關(guān)產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售,產(chǎn)品主要包括磁性納米材料和磁珠法核酸提取純化試劑。公司一直堅(jiān)持以“質(zhì)量、誠(chéng)信、團(tuán)結(jié)、奮進(jìn)”為宗旨,嚴(yán)格規(guī)范質(zhì)量管理體系,持續(xù)創(chuàng)新、精益求精,為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù),被認(rèn)定為國(guó)家級(jí)高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
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