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OT-2移液工作站搭載熱振蕩模塊,助力三種 ELISA 流程實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化

瀏覽次數(shù):1375 發(fā)布日期:2024-2-2  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
酶免疫分析(EIA)或酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是液體樣本中檢測目標(biāo)分子(例如抗原)的常用分析工具,通常用于免疫診斷或研究。該測定一般采用 96 孔板格式,其工作流程通常包括試劑轉(zhuǎn)移和混合,以及一些在恒定溫度下的孵育和洗滌步驟。這些步驟均要求樣本處理具備高度一致性。為了實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化,有研究人員使用 OT-2 自動(dòng)化移液工作站搭配熱振蕩模塊,開發(fā)和測試了三種 ELISA 全自動(dòng)化方案,包括 Takara Bio 的人纖維連接蛋白(FN)夾心 EIA,Tecan 的唾液皮質(zhì)醇競爭 ELISA,以及 Cell Sciences 的中和 SARS-CoV-2 抗體競爭 ELISA。
 
實(shí)驗(yàn)簡介:
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)是一種通過高度特異的抗體-抗原的相互作用對液體樣本的目標(biāo)分子(例如抗原)進(jìn)行檢測和定量的技術(shù)。這種測定通常在 96 孔或 384 孔板上進(jìn)行,其提供用于固定抗原的固體表面,一般通過將抗原直接連接到固體表面或通過使用預(yù)涂在固體表面上的捕獲抗體來實(shí)現(xiàn)。通過該過程,它能夠?qū)⒖乖c樣本中其他非靶標(biāo)分子分離開來。
 
ELISA 的常規(guī)操作步驟包括試劑轉(zhuǎn)移、孵育以及重復(fù)洗滌,這些步驟可以在 OT-2 上輕松實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。在每個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟之間會進(jìn)行連續(xù)的洗滌,以去除未結(jié)合的分子。為了防止剩余的試劑被帶到下一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟中,把殘留的液體全部吸走顯得尤為重要。Opentrons 的 8 通道移液器可進(jìn)行高效、精準(zhǔn)的移液處理,以充分滿足 ELISA 中試劑轉(zhuǎn)移和洗滌的需求。此外,還可以通過添加 Opentrons 溫控模塊或熱振蕩模塊,以提升自動(dòng)化水平和滿足實(shí)驗(yàn)中樣本孵育環(huán)節(jié)所需的恒溫功能(例如設(shè)定 37℃ 以促進(jìn)抗原-抗體相互作用)。
 
方案亮點(diǎn):
1、配備 8 通道移液器和熱振蕩模塊的 OT-2 移液工作站,具備高精度自動(dòng)化完成 ELISA 的能力。
2、在更高通量設(shè)置中,該方案可以在最短的動(dòng)手時(shí)間內(nèi)處理多達(dá) 96 個(gè)樣本。
 
部分方案圖片:
篇幅原因此處僅截取部分示例



 
 
通過使用 OT-2 進(jìn)行三種 ELISA 檢測,作者得出結(jié)論:

1、在 OT-2 上進(jìn)行的稀釋處理和吸光度測量顯示出高度一致的結(jié)果,證實(shí)了 OT-2 液體處理的精確性和可重復(fù)性。
2、根據(jù)廠家說明書的要求,該對照組的 OD450 值都在有效范圍內(nèi),驗(yàn)證了實(shí)驗(yàn)的有效性。
3、通過比較抑制率(確定樣本中是否存在中和抗體),成功檢測到先前被診斷為 SARS-CoV-2 抗體陽性的樣本中存在的中和抗體。
 
綜上所述,該實(shí)驗(yàn)在檢測中和抗體方面表現(xiàn)出優(yōu)越的精確性和可靠性,OT-2 的樣品處理能力足以與傳統(tǒng)手動(dòng)操作方法相媲美。
來源:合創(chuàng)生物工程(深圳)有限公司
聯(lián)系電話:0755-26417273
E-mail:marketing.china@opentrons.com

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