一、 什么是同種型對照抗體?
選擇和使用正確的同種型對照抗體是所有體內實驗的重要組成部分。這些抗體用作陰性對照——它們與主要靶向抗體的確切宿主物種、同種型和亞類相匹配,但對目標生物體或物種中存在的蛋白質沒有特異性。同型對照抗體被設計為在體內動物模型中不結合,但保留實驗中使用的一抗的所有非特異性特征。
二、 為什么在體內實驗中納入同型對照治療組很重要?
需要納入同種型對照治療組才能生成可靠的數據,因為它使研究人員能夠準確地區(qū)分從一抗以抗原特異性方式結合觀察到的結果和從非抗原特異性結合或抗體注射的其他非特異性效應觀察到的結果。
給予動物的一抗可以與細胞上的 Fc 受體發(fā)生非抗原特異性相互作用,包括 B 細胞、樹突狀細胞、NK 細胞、巨噬細胞等。有時 Fc 受體結合參與一抗的作用機制,例如抗體定向細胞毒性 (ADCC)。然而,非抗原特異性 Fc 受體結合可能導致可觀察到的與抗原特異性結合無關的生物效應或表型。與一抗同種型和亞類相匹配的同種型對照抗體也將與 Fc 受體結合,從而使研究人員能夠控制這些效應。
除了匹配同種型和亞類外,理想的同種型對照還必須與一抗的宿主物種匹配。許多用于小鼠模型體內研究的一抗單克隆抗體是利用雜交瘤技術在大鼠或倉鼠身上產生的。當異種大鼠或倉鼠 IgG 注射到小鼠體內時,可能會針對注射的抗體產生免疫反應。多次注射增加了這種可能性。與 Fc 受體結合一樣,這也可能導致與抗原特異性結合無關的可觀察表型。包括一組用與一抗宿主物種相匹配的同種型對照抗體治療的小鼠,使研究人員能夠控制這些非抗原特異性效應。
三、 有關同型對照的常見問題
1、可以使用未治療組或 PBS 治療組代替同型對照治療組嗎?
不建議使用未經處理的組或 PBS 處理的組作為簡化的陰性對照。必須使用同種型對照抗體來準確區(qū)分由于一抗以抗原特異性方式結合而觀察到的結果和由于非抗原特異性結合或其他非特異性相互作用而觀察到的結果。
2、如果用不同宿主物種、同種型或亞類的多種一抗治療小鼠,對照組中的小鼠是否需要用多種同種型對照抗體治療,還是單一同種型對照抗體就足夠了?
由于抗體的宿主物種、同種型和亞類決定了其潛在的非特異性效應,因此同種型對照組必須與一抗處理組進行相同的處理。例如,如果第一組注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體,則同種型對照組也必須注射大鼠 IgG2a 和大鼠 IgG2b 抗體。
3、為什么選擇 Bio X Cell 同型對照抗體?
Bio X Cell 提供廣泛的同種型對照抗體,適用于體內和體外應用。我們的同型對照具有:
卓越的純度我們優(yōu)化的專有抗體制造方法可確保獲得超純抗體解決方案,無需添加蛋白質或化學物質。使用 SDS-PAGE 對每批產品的純度進行 QC 測試。
超低內毒素水平每個批次的內毒素水平均經過 QC 測試。我們的InVivo MAb 產品≤ 2EU/mg,InVivo Plus 產品≤ 1EU/mg。如果需要內毒素水平低于 1EU/mg,請聯系我們的技術支持了解詳細信息。
無病原體每批InVivo Plus 產品均經過全面的鼠類病原體篩查。結果詳細記錄在特定產品的數據表中,以幫助您遵守 IACUC 和動物設施的要求。
低蛋白質聚集我們專有的抗體制造方法可確?贵w解決方案的蛋白質聚集水平非常低。此外,每批InVivo Plus 產品均經過聚合水平 QC 測試,并保證低于總蛋白的 5%。
4、如何選擇合適的同型對照抗體?
同種型對照抗體必須與一抗的宿主物種、同種型和亞類相匹配。為了方便客戶,我們在每個產品頁面上都包含了這些重要的產品信息以及所有一抗的推薦同型對照。下表是適用于體內和體外研究的 Bio X Cell 同型對照抗體的完整列表。
Description | Clone | Host | Isotype | InVivoMab™ Catalog no. | InVivoPlus™ Catalog no. |
Armenian Hamster IgG Isotype Control, Anti-Glutathione S-Transferase | PIP | Armenian Hamster | IgG | BE0260 | N/A |
Polyclonal Armenian Hamster IgG | N/A | Armenian Hamster | IgG | BE0091 | BP0091* |
Polyclonal Goat IgG | N/A | Goat | IgG | BE0130 | N/A |
Hamster IgG F(Ab')2 Fragments | Hamster IgG F(Ab')2 Fragments | Hamster | Polyclonal | BE0091-FAB | N/A |
Human IgG2 Isotype Control | N/A | Human | IgG2, Λ | BE0301 | BP0301* |
Human IgG1 Isotype Control | N/A | Human | IgG1, Κ | BE0297 | BP0297* |
Polyclonal Human IgG | N/A | Human | IgG | BE0092 | N/A |
Mouse IgG2c Isotype Control, Anti-Dengue Virus | DV5-1 | Mouse | IgG2c, Κ | BE0366 | N/A |
Mouse IgG1 Isotype Control, Unknown Specificity | MOPC-21 | Mouse | IgG1, Κ | BE0083 | BP0083* |
Mouse IgG2a Isotype Control, Unknown Specificity | C1.18.4 | Mouse | IgG2a, Κ | BE0085 | BP0085* |
Mouse IgG2b Isotype Control, Unknown Specificity | MPC-11 | Mouse | IgG2b, Κ | BE0086 | BP0086* |
Polyclonal Mouse IgG | N/A | Mouse | IgG | BE0093 | N/A |
Polyclonal Rabbit IgG | N/A | Rabbit | IgG | BE0095 | N/A |
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Trinitrophenol | TNP6A7 | Rat | IgG1, Λ | BE0290 | BP0290* |
Rat IgG1 Isotype Control, Anti-Horseradish Peroxidase | HRPN | Rat | IgG1, Κ | BE0088 | BP0088* |
Rat IgG2a Isotype Control, Anti-Trinitrophenol | 2A3 | Rat | IgG2a, Κ | BE0089 | BP0089* |
Rat IgG2b Isotype Control, Anti-Keyhole Limpet Hemocyanin | LTF-2 | Rat | IgG2b, Κ | BE0090 | BP0090* |
Polyclonal Rat IgG | N/A | Rat | IgG | BE0094 | N/A |
Polyclonal Syrian Hamster IgG | N/A | Syrian Hamster | IgG | BE0087 | BP0087* |
同型對照 | 描述 |
InVivoMAb™ 系列同型對照 | 體內和體外使用的可靠同種型對照抗體。 |
InVivoPlus™ 系列同型對照 | 超純同型對照抗體,可用于在最嚴格的標準下進行的實驗。點擊了解InVivoPlus與InVivoMAb的差異,包括鼠病原體和蛋白質聚集篩選。 |
RecombiMAb™ 系列同型對照 | 重組同型對照抗體—多物種、多同型和多Fc結構域沉默突變類型提供。 |