黃曲霉毒素(aflatoxins)是一種由黃曲霉和寄生曲霉等真菌經(jīng)過聚酮途徑產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物，其結(jié)構(gòu)通常包含一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰?fù)�，天然產(chǎn)生的黃曲霉毒素根據(jù)其化學(xué)結(jié)構(gòu)不同分為B1、B2、G1、G2四種。

食品遭受產(chǎn)毒真菌以及霉菌毒素污染的問題在世界范圍內(nèi)反復(fù)發(fā)生，被污染的農(nóng)作物作為飼料資源被畜禽食用后， 攜帶的霉菌毒素又可在肉、蛋、奶等食品中蓄積，通過食物鏈傳遞， 危害人類健康。

逗點(diǎn)生物Copure® 226多功能凈化板
 

逗點(diǎn)生物采用24孔Copure® 226多功能凈化板，實(shí)現(xiàn)了黃曲霉毒素的快速、高通量檢測。建立玉米粉中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2檢測的LC-MS/MS檢測方法。兩個水平（0.5.ng/g，1.0 ng/g）的加標(biāo)回收率均在90-110 %之間，孔間回收率CV值小于5 %。

本方法操作簡便快捷，具有回收率高和除雜效果好的優(yōu)勢，能夠作為 玉米粉中黃曲霉毒素檢測的參考方法。

本方法適用于谷物及其制品、豆類及其制品、堅果及籽類、油脂及其制品、調(diào)味品、嬰幼兒配方食品和嬰幼兒輔助食品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測定。

參照 《GB 5009.22-2016  食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定》。


一、樣品前處理


 

biocomma®多管旋渦混勻儀

1.1樣本提取

1）稱取 5 g試樣于50 mL離心管中，加入一定量同位素內(nèi)標(biāo)工作液振蕩混合后靜置30 min。

2）加入20 mL乙腈-水溶液（84+16），渦旋混勻，置于超聲波/渦旋振蕩器或搖床中振蕩20 min，在6000 r/min下離心10 min，取上清液備用。

1.2樣本凈化

1）將24孔凈化板放置在24孔收集板上，再向凈化板孔中加入6 mL樣品提取液。

2）將24孔凈化板和收集板放置在24孔正壓提取裝置下，開啟氣閥開關(guān)，使凈化板孔和輸氣孔保持對應(yīng)，匹配良好。

3）調(diào)整氣體輸出壓力，使樣品提取液過濾至收集板中。

4）取4 mL樣品凈化液，40℃下氮?dú)獯蹈�，�? mL初始流動相復(fù)溶，渦旋 30s 溶解殘渣，過0.22 μm微孔濾膜，上機(jī)分析。

▲biocomma®24孔正壓提取裝置▲

二、儀器條件
 

儀器設(shè)備：UPLC-MS/MS

Thermo Scientific TSQ Endura

色譜柱：Thermo  C18   

2.1x100 mm， 1.7 um

流動相：A：0.1%甲酸水    B：乙腈

流動相梯度：初始80%A，20%A（0 min~2 min），20%A（2 min~3 min），80%A（3 min~3.1min），80%A（3.1min~5min）

流速：0.3 mL/min

柱溫：室溫

進(jìn)樣體積：5.0 mL

質(zhì)譜條件

檢測方式：多離子反應(yīng)檢測（MRM）

表1 離子源控制條件

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果


 

圖1  使用多功能凈化板處理前后的脫色效果圖

①玉米粉樣品-未凈化處理   

②Copure®226多功能凈化板-凈化處理

從圖1中可知，經(jīng)過Copure® 226多功能凈化板凈化處理后，提取液中色素被明顯吸附，減少雜質(zhì)干擾。

 

圖2中，雜質(zhì)被明顯吸附，TIC色譜圖中雜峰更少，上機(jī)液更干凈；24個孔中黃曲霉毒素的回收率均在90-110%之間，孔間回收率CV值小于5 %，能滿足實(shí)驗(yàn)使用需求。

表3  玉米粉中黃曲霉毒素加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果





四、訂購信息