在生物技術(shù)藥物的研發(fā)領(lǐng)域，單克隆抗體類藥物由于具有廣泛的臨床應(yīng)用前景，已經(jīng)成為了研究熱點(diǎn)。組織交叉反應(yīng)（TCR）試驗(yàn)是在臨床前評價(jià)單抗類藥物的安全性的重要手段，不僅可以確定非臨床安全性試驗(yàn)的相關(guān)動(dòng)物種屬，還可以預(yù)測藥物的毒性靶器官。目前免疫組織化學(xué)技術(shù)、組織芯片技術(shù)、Western印跡分析技術(shù)以及流式細(xì)胞等技術(shù)也都開始應(yīng)用于組織交叉反應(yīng)試驗(yàn)。
單克隆抗體藥物具有對抗原結(jié)合的特異性，可作用于表達(dá)其抗原表位的靶組織。因此如果在正常組織中存在相同或相似的抗原表位，單克隆抗體可能會(huì)與靶組織以外的其他組織發(fā)生結(jié)合，從而產(chǎn)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)。開展TCR試驗(yàn)是區(qū)分“在靶”結(jié)合的靶器官和“脫靶”結(jié)合的非靶器官的重要手段，同時(shí)還可以用于毒性評價(jià)的動(dòng)物種屬的選擇提供參考。
相關(guān)動(dòng)物種屬指的是表達(dá)與人相同的靶抗原并表現(xiàn)出相似的組織交叉反應(yīng)特性的動(dòng)物種屬。目前,主要使用體外免疫組織化學(xué)、Western印跡分析等的方法,在正常人及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織評估有無交叉反應(yīng),要求在新藥臨床申請Ⅰ期臨床試驗(yàn)前完成。
毒理研究的目的是了解毒性反應(yīng)劑量、時(shí)間、強(qiáng)度、癥狀、靶器官及可逆性等，為臨床方案提供參考、預(yù)測出現(xiàn)的毒性反應(yīng)，制訂臨床防護(hù)措施、保證受試者用藥安全。美迪西毒理研究設(shè)置的功能實(shí)驗(yàn)室包括：動(dòng)物飼養(yǎng)室、中心實(shí)驗(yàn)室、毒代實(shí)驗(yàn)室、分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、細(xì)胞室、遺傳毒性實(shí)驗(yàn)室、病理實(shí)驗(yàn)室、解剖室、供試品保管室、供試品配置室、檔案室等。內(nèi)設(shè)SPF級實(shí)驗(yàn)室、大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室和普通實(shí)驗(yàn)室，可進(jìn)行猴、狗、家兔、豚鼠、大鼠、小鼠等不同種屬動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究。。
組織交叉反應(yīng)(TCR)是用于評價(jià)抗體或抗體類生物技術(shù)藥物與人或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物組織是否存在潛在結(jié)合位點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)方法。如在西妥昔單克隆抗體與正常人的組織交叉反應(yīng)的研究中，有研究者評價(jià)了西妥昔單克隆抗體與正常人組織的免疫交叉反應(yīng),并與已上市對照藥物愛必妥組織交叉反應(yīng)的結(jié)果進(jìn)行比較,評價(jià)西妥昔單抗與上市對照品愛必妥的一致性,為西妥昔單抗藥效學(xué)、安全性評價(jià)中所使用動(dòng)物種屬的選擇及西妥昔單抗臨床使用與研究提供依據(jù)。
還有研究者采用免疫組化方法檢測人源性單克隆抗體與人和食蟹猴冰凍組織的組織交叉反應(yīng)。該實(shí)驗(yàn)選用靈敏性高的ABC法,基本原理為冰凍組織切片加入一抗,再加入生物素標(biāo)記的二抗,再加ABC復(fù)合物(含HRP)與生物素(Biotin)結(jié)合,HRP催化DAB顯色等等。
當(dāng)相同或相關(guān)抗原決定簇在人非預(yù)定的細(xì)胞或靶組織表達(dá)時(shí)，可觀察到抗體與它們結(jié)合。非靶組織結(jié)合可能具有嚴(yán)重后果，特別是使用藥理活性抗體或細(xì)胞毒性免疫結(jié)合物時(shí)。因此，一般在I期臨床試驗(yàn)前應(yīng)經(jīng)過用人組織或細(xì)胞進(jìn)行交叉反應(yīng)性或非靶組織結(jié)合的實(shí)驗(yàn)室檢測。然而組織交叉反應(yīng)在動(dòng)物種屬選擇中作用有限，因此在充分暴露并評估藥物的安全性的研究時(shí)，需要建立和完善生物技術(shù)藥物的臨床前的安全評價(jià)體系的基礎(chǔ)，并根據(jù)藥物作用機(jī)制設(shè)計(jì)和開展試驗(yàn)，選擇適宜的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，設(shè)定合理的試驗(yàn)劑量和檢測恰當(dāng)?shù)纳�理指�?biāo)。