近年來(lái)，我國(guó)乳腺癌的發(fā)病率呈持續(xù)增高的趨勢(shì)，在某些發(fā)達(dá)城市，乳腺癌在女性惡性腫瘤中已位居首位，根據(jù)雌激素受體的ER的類(lèi)型是呈現(xiàn)激素非依賴(lài)性和依賴(lài)性，研究ER對(duì)乳腺癌的發(fā)病機(jī)制，臨床治療和預(yù)后判斷，有著重要的意義。

ER是乳腺癌重要的生物學(xué)標(biāo)志物，在乳腺的發(fā)育生長(zhǎng)過(guò)程中受體內(nèi)雌激素和孕激素的調(diào)控，ER是乳腺細(xì)胞中的雌激素受體，癌癥發(fā)生時(shí)，對(duì)于陽(yáng)性ER的患者可以通過(guò)內(nèi)分泌的治療達(dá)到70-80%的效果，而對(duì)于陰性ER患者的治療效果還不到10%，表明陰性ER患者已經(jīng)完全脫離激素的調(diào)控。本研究中，主要對(duì)陰性ER乳腺癌細(xì)胞侵入淋巴細(xì)胞探究ERα對(duì)乳腺癌淋巴轉(zhuǎn)移過(guò)程中的相關(guān)關(guān)系，

實(shí)驗(yàn)材料：

以MCF-7乳腺癌細(xì)胞株為實(shí)驗(yàn)材料，使用基因編輯技術(shù)處理后的Cas9-ERα,基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑MG6001處理的后的Cas9-ERα+ERα,以及 Cas9-vinculin，使用瑞典的HoloMonitor M4進(jìn)行拍攝細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)和遷移，觀察4小時(shí)，每2min拍攝一次。對(duì)比不同實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)情況。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果,對(duì)比于對(duì)照組發(fā)現(xiàn)Cas9-ERα的細(xì)胞遷移性明顯增高，并分別捕捉到細(xì)胞變形過(guò)程中的五種不同形態(tài)，（文章補(bǔ)充材料中1-5movie）。并且在Cas9-ERa+MG6001該實(shí)驗(yàn)組中金屬蛋白酶抑制劑并沒(méi)有能抑制細(xì)胞缺少ERα后的高侵襲性。并分析了五種不同形態(tài)的細(xì)胞百分比。Cas9-vinculin的細(xì)胞遷移及細(xì)胞運(yùn)動(dòng)速率同樣明顯高于對(duì)照組，同時(shí)也觀察到可細(xì)胞變形過(guò)程中的五種不同形態(tài)，（文章補(bǔ)充材料中6-10movie）。綜合文章數(shù)據(jù)表明了在乳腺癌細(xì)胞中，ERα的缺失會(huì)導(dǎo)致黏著斑蛋白（Vinculin）的表達(dá)量下降會(huì)直接導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的肌球蛋白輕鏈p-MLC的增加，從而導(dǎo)致細(xì)胞的侵襲性增加。

HoloMonitor M4 非標(biāo)記，活細(xì)胞成像及分析系統(tǒng)，實(shí)時(shí)追蹤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)過(guò)程及分析細(xì)胞運(yùn)動(dòng)軌跡和運(yùn)動(dòng)速率，實(shí)時(shí)高效地提供給科研工作者更多數(shù)據(jù)及分析結(jié)果