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熒光western Blot:選擇可見熒光檢測還是紅外檢測?

瀏覽次數(shù):6374 發(fā)布日期:2016-6-29  來源:Azure biosystems

熒光western Blot:選擇可見熒光檢測還是紅外檢測?

熒光檢測的主要優(yōu)勢之一是可以進(jìn)行多重檢測(2種甚至更多種蛋白)。當(dāng)前的實(shí)驗(yàn)技術(shù)允許使用近紅外檢測兩種蛋白也可以使用三色RGB可見熒光檢測三種蛋白。

近紅外檢測的優(yōu)勢

同時(shí)檢測三種蛋白要比兩種好,為什么我們還要選擇紅外成像呢?

紅外熒光檢測印跡膜上的靶標(biāo)蛋白是行之有效的western blot方法,特別是在探測低豐度蛋白的微弱信號時(shí),近紅外檢測是最好的選擇。NC(硝酸纖維素)膜存在自發(fā)熒光,紅外區(qū)背景噪音相比于可見熒光區(qū)低很多,信噪比更高,更容易檢測到靶標(biāo)蛋白。

 

 

激光-紅外western

Azure c系列成像系統(tǒng)采用激光光源激發(fā),發(fā)射光更接近染料的最大發(fā)射波長680nm和800nm,二抗產(chǎn)生的信號更高。

 

可見熒光檢測的優(yōu)勢

當(dāng)需要同時(shí)檢測三個(gè)蛋白時(shí),可見熒光顯然是最佳的選擇?梢姛晒饩邆浜芎玫撵`活性,有多種可見熒光染料可供選擇。如果您正在使用可見熒光染料(發(fā)射光譜可被區(qū)分)進(jìn)行其它實(shí)驗(yàn),很容易將這些染料應(yīng)用于Western blot實(shí)驗(yàn)中。

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