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細(xì)胞凋亡概述

瀏覽次數(shù):2066 發(fā)布日期:2014-9-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

凋亡和壞死是兩種常見細(xì)胞死亡方式,具有截然不同的特征。凋亡是細(xì)胞程序性死亡的主要表現(xiàn)形式,是一個(gè)主動(dòng)的生理反應(yīng);壞死則是細(xì)胞對嚴(yán)重?fù)p傷的一種被動(dòng)反應(yīng)和變性過程。凋亡過程受細(xì)胞內(nèi)一系列相關(guān)的分子所調(diào)控,涉及一系列復(fù)雜的生理生化反應(yīng),并伴隨有典型的形態(tài)學(xué)改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞的解體。凋亡細(xì)胞的許多形態(tài)學(xué)改變是特征性的,甚至是唯一與凋亡相關(guān)的,因此可以作為檢測凋亡的基礎(chǔ)。凋亡檢測的關(guān)鍵是將凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞以及壞死細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確的區(qū)分。

細(xì)胞凋亡發(fā)生時(shí),染色體DNA以核小體為單位發(fā)生降解,細(xì)胞核濃縮,碎裂的核物質(zhì)被胞膜包裹游離出細(xì)胞外,成為凋亡小體。這些特征性變化可以通過顯微鏡直接觀察,或用某些熒光染料染色后,在熒光顯微鏡下觀察,或進(jìn)行流式細(xì)胞分析。然而這些特征通常難以與壞死細(xì)胞進(jìn)行準(zhǔn)確區(qū)分。

凋亡早期階段,細(xì)胞膜雖然能夠維持結(jié)構(gòu)的完整,但喪失了其磷脂分子分布的非對稱性,導(dǎo)致細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜外側(cè),使凋亡細(xì)胞易被吞噬細(xì)胞識別。通過對膜上的磷脂酰絲氨酸進(jìn)行染色即可區(qū)分正常細(xì)胞與凋亡細(xì)胞,再進(jìn)一步對核進(jìn)行染色,由于有完整結(jié)構(gòu)的膜屏障,凋亡細(xì)胞的核無法被染色,而壞死細(xì)胞可以被染色,這樣就準(zhǔn)確地區(qū)分了凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。細(xì)胞凋亡時(shí),伴隨一系列蛋白酶學(xué)的改變,多種Caspase活性變化參與凋亡的啟動(dòng)、執(zhí)行過程。檢測Caspase活性變化,是分析凋亡發(fā)生機(jī)制和特征的另一方法。某些情況下,凋亡細(xì)胞不具有全部的凋亡特征,例如特征性的DNA片段化不明顯,而出現(xiàn)DNA隨機(jī)降解;有時(shí)Caspase活性的改變與凋亡不相關(guān),即凋亡時(shí)Caspase活性不變,而Caspase活性變化但無凋亡發(fā)生。總的來說,觀察凋亡時(shí),應(yīng)該觀察反映凋亡不同特征的幾個(gè)指標(biāo),綜合分析。 

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