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高性能液體色譜系統(tǒng)介紹

瀏覽次數(shù):3609 發(fā)布日期:2011-1-6  來源:藝達思貿(mào)易(上海)有限公司

什么是HPLC?
    我們所有關(guān)于配件的討論.看起來似乎只適用于HPLC系統(tǒng)一使用我們所討
論的配件進行的主要液體傳輸應(yīng)用。
    HPLC是高性能液體色譜系統(tǒng)(High Performance LiquidChromatography)
的首字母縮寫。(很多人以為“P”是表示“壓力”,因為很多HPLC應(yīng)用
中的壓力確實很高。但是“p”其實是表示“性能”。
    HPLC在1960年開始使用。這項技術(shù)使得分析師可以把由已知和未知成分
組成的樣品分解為組成部分的級別,然后定量分析樣品中的每個組成部分。并且由干這項技術(shù)沒有破壞性,HPLC成為實驗室應(yīng)用中用途極為廣泛的儀器之一?茖W(xué)家們在使用HPLC系統(tǒng)分析過樣品后,還可以繼續(xù)對
樣品進行其它測試。
    通過將樣品放入作為流動相的液體化學(xué)蒸汽中實現(xiàn)分離。這液體化學(xué)蒸
汽將樣品帶入特制的管道中,這個特制管道(管柱)填充有作為固定相的微型化學(xué)活性顆粒。在管柱內(nèi)部,樣品與流動相和固定相均發(fā)生相互作用,并開始化學(xué)分離為它的組成部分。系統(tǒng)中的其它設(shè)備生成并記錄那些分離的樣品組成部分的分析數(shù)據(jù)。然后那些數(shù)據(jù)被記錄在一個被稱為色譜的圖表上。

HPLC系統(tǒng)由何組成?
    在我們進一步展開討論之前必須首先了解標(biāo)準(zhǔn)HPLC系統(tǒng)的組成部分。
    一個HPLC系統(tǒng)包括七個基本組成部分,每部分都具有重要的功能:
    溶劑容器--溶劑容器用來裝流向系統(tǒng)的化學(xué)溶液。因為這種溶液流經(jīng)整
個分析過程我們稱之為流動相。
    泵--泵將流動相從儲存池中抽出,并推動其流向系統(tǒng)其他部分。目前最
常用的泵是雙活塞泵--可以在高壓狀態(tài)下保持穩(wěn)定的流速。
    噴射閥--噴射閥將樣品引入流動相。最常用的噴射閥是一種六端口、雙
位置閥。這種類型的閥可以控制一定數(shù)量的樣品重復(fù)性地引入流動相通
道,卻基本上不影響系統(tǒng)的其它部分。

典型噴射閥管件

    管柱--通常被稱為日PLC系統(tǒng)的“心臟”,將管柱看成一種化學(xué)“過濾器”。如上文提到的那樣,管柱是具有特定長度和內(nèi)徑并且通常充滿小顆粒的管道。這些顆粒通常有一層化學(xué)物質(zhì)涂層,這種化學(xué)物質(zhì)是設(shè)計用來與樣品成分發(fā)生相互作用。并提高分離的。通常情況下,這些顆粒(前面提到的固定相因為創(chuàng)門無法在系統(tǒng)中移動)一是直徑很小的硅土顆粒。并且通常是用硅十八烷(C18)化學(xué)性地粘結(jié)在這些顆粒的表面。有時不用硅土而是采用其它聚合材料如其它更專門的填充材料。同樣,除采用C18粘結(jié)在顆粒的表面之外,還可以使用更專門的分子粘結(jié)在基料上,進一步提高管柱中的分離程度。
    檢測器--檢測器是用來在樣品成分隨流動相移動時,“觀察”在管柱中
分離的樣品成分。最常用的檢測器透過一塊特殊的窗口(稱為流通池)發(fā)射一束紫外光。在樣品成分通過流通池時,穿過流通池的光線數(shù)量發(fā)生
變化。檢測器的電子裝置就把這種透射光強度變化轉(zhuǎn)變成一個信號。
隨著技術(shù)費用的不斷下降,其它種類的檢測器更為常用。諸如質(zhì)量分光
計(MS)和核磁共振(NMR)檢測器之類的檢測器在很多實驗室越來越頻繁的使用起來。隨著更高級的檢測器可以應(yīng)用在色譜上,HPLC--很多實驗室的核心設(shè)備--作為一種分析技術(shù)的使用正日益頻繁。

    記錄儀--記錄儀將檢測器生成的信號翻譯成圖表,產(chǎn)生色譜圖!矃⒖下面的信號一時間圖)

色譜樣圖

早期,這個裝置僅僅是一個帶狀記錄紙的記錄儀,帶有一個隨檢測器產(chǎn)生的信號而移動的筆。在以特定速度移動的紙上進行記錄。然后應(yīng)該小心地切掉峰值,并就一定規(guī)模進行紙面加權(quán),進而獲得半定量數(shù)據(jù),F(xiàn)在,記錄儀裝置通常是一臺計算機,其上裝有設(shè)計軟件,不但可以翻譯檢測器信號,還可以對數(shù)據(jù)進行數(shù)字化處理。這就可以生成更多的再生
性信息,使越來越小的樣品使用起來也很方便。
    廢料池--基本HPLC系統(tǒng)的最后一個組成部分,在流動相和樣品成分通過
系統(tǒng)之后,廢料池將它們安全地收集起來。

典型的HPLC系統(tǒng)


從系統(tǒng)的角度來看組成部分
    現(xiàn)在您了解了HPLC系統(tǒng)關(guān)鍵組成部分的基本常識,讓我們再次對整個過
程進行一下回顧。一旦流動相準(zhǔn)備好之后,泵就將推動其向系統(tǒng)移動,在那里流動相遇到樣品,并帶著樣品一起通過管柱。在管柱內(nèi),樣品組成部分選擇性地與流動相和固定相相互作用,在它們流出管柱時,已經(jīng)分解成多個類似分子的組。離開管柱后,樣品組成部分組就通過檢測器。檢測器在這里“觀察”各組成部分并向記錄裝置發(fā)送信號記錄裝置收集信號并進行處理。然后廢料池收集流體,以便處理。

其它系統(tǒng)“成員”
    盡管離開這七個基本組成部分HPLC系統(tǒng)無法正常工作。當(dāng)它的組成部分
多過這七部分時,它當(dāng)然還是可以正常工作的。事實上,有很多常用的附件可以幫助提高標(biāo)準(zhǔn)HPLC系統(tǒng)的性能。

    過濾器--位于溶劑容器內(nèi)沿流道方向大量分布,過濾器在維護系統(tǒng)性能上起到了重要作用。過濾器防止固體顆粒通過系統(tǒng),錯誤的使用過濾器會導(dǎo)致系統(tǒng)部件損壞,增加停機時間,并且得到不令人滿意的色譜結(jié)果。
保護管柱--保護管柱的功能正如它的名字一樣。它們保護主要的分析管
柱。它們通常為分析管柱的小類型,用來捕獲某些樣品組成部分,它們會頑固地粘附在分析管柱的內(nèi)部。對主要的分析管柱,保護管柱起到一個保險單的作用,幫助延緩較為昂貴的主管柱更換。

    背壓調(diào)節(jié)器--一個背壓調(diào)節(jié)(BPR)通常放置在檢測器和廢料池之間的管道內(nèi)。它在管道內(nèi)產(chǎn)生附加壓力,來防止任何可能已溶解于溶劑中的氣體產(chǎn)生排氣作用,并沿流動相流道產(chǎn)生氣泡。(如果任何氣泡通過檢測器的流通池,一種“噪音”現(xiàn)象可能會出現(xiàn)在色譜的基線上,限制了分析的敏感性。)

來源:藝達思貿(mào)易(上海)有限公司
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E-mail:fluidics.asia@idexcorp.com

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