目的：建立復(fù)方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測(cè)定方法。

方法：毛細(xì)管氣相色譜法，以乙酰苯胺為內(nèi)標(biāo)，色譜柱為彈性石英毛細(xì)管柱25m×0.32mm×0.52μm(DB-1)柱溫170℃;氣化室溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;載氣為高純氮。

結(jié)果：異煙肼和吡嗪酰胺的線性范圍分別是0.426～2.13mg/ml和1.23～6.13mg/ml;平均回收率分別為99.81%和99.63%。

結(jié)論：方法簡(jiǎn)便，快速，準(zhǔn)確，可作為該制劑的檢測(cè)方法。
關(guān)鍵詞　毛細(xì)管氣相色譜法；異煙肼；吡嗪酰胺；含量測(cè)定

　　復(fù)方利福平片含利福平、異煙肼和吡嗪酰胺三主藥，臨床主要應(yīng)用于治療結(jié)核病，目前，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)為進(jìn)口制劑。關(guān)于該進(jìn)口制劑中各組分的含量測(cè)定方法，文獻(xiàn)報(bào)道有紫外分光光度法^［1］和液相色譜法^［2］，本文采用毛細(xì)管氣相色譜法建立了國(guó)產(chǎn)仿制藥復(fù)方利福平片中異煙肼和吡嗪酰胺的含量測(cè)定方法。

1　儀器、藥品和試劑
　    南京科捷分析儀器有限公司的GC5890氣相色譜儀，毛細(xì)管進(jìn)樣系統(tǒng)，氫火焰離子化檢測(cè)器。
　　異煙肼，吡嗪酰胺和利福平原料藥，對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)，內(nèi)標(biāo)：乙酰苯胺為分析純。

2　方法和結(jié)果
2.1　色譜條件
　　色譜柱：彈性石英毛細(xì)管柱25m×0.32mm×0.52μm(DB-1)。
　　色譜條件：柱溫170℃;氣化室溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;載氣為高純氮，柱前壓0.6MPa;分流進(jìn)樣，分流比為40∶1。
2.2　干擾試驗(yàn)
　　按處方比配制異煙肼和吡嗪酰胺乙酸乙酯溶液1份，另取利福平及空白輔料乙酸乙酯溶液一份，分別取1～3μl注入氣相色譜儀，利福平和空白輔料對(duì)異煙肼和吡嗪酰胺測(cè)定無(wú)干擾。
2.3　標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備
　　取乙酰苯胺適量，加乙酸乙酯溶解并稀釋成每1ml中含6mg的溶液，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液，備用。另取異煙肼對(duì)照品和吡嗪酰胺對(duì)照品適量，置100ml量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋成每1ml中含異煙肼4mg,吡嗪酰胺12mg的對(duì)照品貯備液，另取上述貯備液1.0,2.0,3,0,4.0和5.0ml,置10ml量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液2.0ml,用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，放置，取2μl注入氣相色譜儀，以對(duì)照品與內(nèi)標(biāo)的濃度比作為橫坐標(biāo)，峰面積比為縱坐標(biāo)，進(jìn)行回歸分析，得回歸方程異煙肼為:Y=-0.2008X+0.5236,r=0.9992,線性范圍為0.426～2.13mg/ml；吡嗪酰胺為:Y=-0.0815X+0.6134,r=0.9998,線性范圍為1.23～6.13mg/ml。
2.4　回收率試驗(yàn)
　　量取2.3項(xiàng)下對(duì)照品貯備液1.5,2.0,2.5,3.0和3.5ml,置10ml量瓶中，加入內(nèi)標(biāo)溶液2ml,再加入按處方配比的利福平及空白輔料，用乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，取上清液2μl注入氣相色譜儀，按回歸方程計(jì)算回收率，結(jié)果見(jiàn)表1，2。

表1　吡嗪酰胺回收率試驗(yàn)結(jié)果

 毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)異煙肼和吡嗪酰胺的含量

氣相色譜儀---南京科捷分析研究所