為解決生物樣本處理過(guò)程中保存期短的問(wèn)題，SUPELCO公司推出新一代高效生物防腐劑ProClin150，200，300，5000，可以有效地控制體外診斷試劑中微生物的生長(zhǎng)。當(dāng)濃度達(dá)到0.02%條件下，ProClinâ 系列防腐劑具有廣譜抗菌活性，能在比較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)菌、真菌和酵母菌等微生物的生長(zhǎng)；同時(shí)，它又能保持體系中酶的活性，因此它是一種理想的可替代硫汞撒、疊氮化鈉和慶大霉素等生物防腐劑。

ProClinâ 系列防腐劑的優(yōu)點(diǎn)：

• 廣譜抗菌性，作用速度快；良好的與酶的相容性，不會(huì)影響與酶或抗體的相關(guān)反應(yīng)。
• 使用劑量少，6-20ppm的ProClin300即可達(dá)到抑菌的目的。
• pH適用范圍廣（pH2-8.5^*）,化學(xué)穩(wěn)定性好。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，在25度下保存2年，該防腐劑的活性組分僅損失3%。
• 毒性遠(yuǎn)低于同類(lèi)產(chǎn)品硫汞撒。
• 與水可以任意比混合。

ProClin5000使用范圍pH 2-12

ProClinâ 系列防腐劑作用原理：

ProClinâ 系列防腐劑的活性成分主要是2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮（MCI）和5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮（CMCI）。這兩種成分抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)以及促使細(xì)胞凋亡的原理相同。活性成分在與細(xì)胞膜接觸幾分鐘后，立即可以滲透到膜內(nèi)并抑制細(xì)胞內(nèi)酶的活性（見(jiàn)圖1）。目標(biāo)酶處于細(xì)胞代謝KREBS循環(huán)的中心位置，ProClinâ 系列防腐劑作用KREBS循環(huán)的四個(gè)不同位置(見(jiàn)圖2)：丙酮酸脫氫酶(pyruvate dehydrogenase)，a -酮戊二酸脫氫酶(ketoglutarate dehydrogenase)，琥珀酸脫氫酶(succinate dehydrogenase)和NADH脫氫酶(NADH dehydrogenase)。從而抑制細(xì)胞生長(zhǎng)代謝，大分子的合成，引起細(xì)胞內(nèi)能量水平迅速下降。由于能量體系的崩潰，細(xì)胞不能合成日常代謝所需要的化合物。

所有的細(xì)菌及真菌至少擁有部分KREBS循環(huán)，所以ProClinâ 系列防腐劑的適用的范圍非常廣泛。其次，ProClinâ 系列防腐劑具有多標(biāo)靶作用位點(diǎn)，因此大大降低了因變異產(chǎn)生的微生物的耐藥性。隨著KREBS循環(huán)被阻斷，細(xì)胞產(chǎn)生能量（以合成ATP為標(biāo)志，見(jiàn)圖3）和合成酶等生物活性物質(zhì)的能力迅速下降，但其使用劑量卻保持比較低的水平對(duì)人畜無(wú)害。

ProClin 系列防腐劑性能：

1. ProClin 系列防腐劑對(duì)診斷試劑影響：

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，ProClin 系列防腐劑不會(huì)對(duì)診斷試劑中的關(guān)鍵酶與底物的結(jié)合速率產(chǎn)生影響，比如：辣根過(guò)氧化酶（HRP），堿性磷酸酶（AP）。

圖4. 250ppmProClin300對(duì)HRP(AP)與底物結(jié)合速率的影響



短期效應(yīng)

即使ProClin300的使用濃度超過(guò)推薦濃度15倍時(shí)，其短期內(nèi)對(duì)于HRP和AP的Km和Vmax 無(wú)影響（見(jiàn)表1）。

　

表1.ProClin300對(duì)HRP和AP的Vmax的影響

　

	Km（Mm）	Vmax（ΔA/min/mg prrotein）
辣根過(guò)氧化酶(HRP)	6.9	904
+15ppm ProClin300	6.8	861
辣根過(guò)氧化酶(HRP)	7.9	520
+250ppm ProClin300	8.3	525
堿性磷酸酶(AP)	0.69	138
+15ppm ProClin300	0.56	131
堿性磷酸酶(AP)	1.40	153
+250ppm ProClin300	1.20	142

　

長(zhǎng)期效應(yīng)

長(zhǎng)期使用ProClin 300同樣不會(huì)對(duì)酶（例如：HRP和AP，見(jiàn)圖5）的活性產(chǎn)生影響。

圖5. 4度(37度)下ProClin對(duì)AP (HRP)活性的影響



　

2. ProClin系列防腐劑對(duì)抗體結(jié)合的影響

在推薦使用濃度下，ProClin ^â 系列防腐劑不會(huì)對(duì)抗體的結(jié)合產(chǎn)生影響。通過(guò)研究ProClin 300對(duì)經(jīng)純化過(guò)小鼠IgM抗原與聯(lián)結(jié)HRP的抗-小鼠IgM抗體之間結(jié)合的影響，表明濃度在300ppm以下，ProClin 300不會(huì)對(duì)其產(chǎn)生影響（見(jiàn)圖6）。50ppm的ProClin 300保存上述抗體35天同樣無(wú)影響。

圖6. ProClin300對(duì)連接HRP的抗體影響

ProClin系列防腐劑的參數(shù)

2006年02月08日

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