細(xì)胞培養(yǎng)工藝廣泛應(yīng)用于藥物開發(fā)、疫苗生產(chǎn)、基因治療、細(xì)胞治療等方面。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要提供適宜的條件(溫度、濕度、PH值、氣體濃度等),使細(xì)胞生長和繁殖,其中,細(xì)胞密度是影響細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)的關(guān)鍵因素之一,本文我們主要介紹細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞密度對(duì)細(xì)胞的狀態(tài)、生長、代謝和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響及檢測方式。
細(xì)胞密度如何影響細(xì)胞培養(yǎng)效果?
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,適宜的細(xì)胞密度因具體細(xì)胞類型和培養(yǎng)目的而異。低密度環(huán)境下,細(xì)胞擁有充足的營養(yǎng)和空間,促進(jìn)快速增殖和高效代謝;而高密度時(shí),資源競爭加劇,導(dǎo)致生長速率下降,代謝廢物積累,可能引發(fā)代謝壓力,影響細(xì)胞健康和功能發(fā)揮。因此,合理控制細(xì)胞密度是優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)、維持細(xì)胞正常生理狀態(tài)的關(guān)鍵。
進(jìn)行細(xì)胞密度測量面臨的挑戰(zhàn)
細(xì)胞團(tuán)簇和團(tuán)聚:細(xì)胞培養(yǎng)過程中可能會(huì)出現(xiàn)團(tuán)簇和團(tuán)聚狀態(tài),在顯微鏡下觀察時(shí)候時(shí),會(huì)影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
死活細(xì)胞的區(qū)分:準(zhǔn)確區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞是計(jì)數(shù)中的關(guān)鍵,使用臺(tái)盼藍(lán)及AOPI染色法,增加了操作復(fù)雜性。
樣本處理和準(zhǔn)備:細(xì)胞在轉(zhuǎn)移、稀釋和處理過程中可能受到損傷,導(dǎo)致計(jì)數(shù)結(jié)果不準(zhǔn)確。
時(shí)間局限性:細(xì)胞生長速度快,細(xì)胞計(jì)數(shù)需要快速而準(zhǔn)確的評(píng)估。
如何高效準(zhǔn)確檢測細(xì)胞密度?
CytScop®Mini 智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀
CytScop®Mini 智能細(xì)胞計(jì)數(shù)儀用AOPI雙熒光和臺(tái)盼藍(lán)染色法原理,采用獨(dú)特的明場和熒光寬場大視野顯微光學(xué)系統(tǒng),結(jié)合一次性微流控芯片,搭載高精準(zhǔn)細(xì)胞識(shí)別算法,實(shí)現(xiàn)有效穩(wěn)定的細(xì)胞計(jì)數(shù)、細(xì)胞活和細(xì)胞濃度的測定。小型化的機(jī)身助力細(xì)胞計(jì)數(shù)分析隨時(shí)隨地發(fā)生,軟件系統(tǒng)可升級(jí),實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)藍(lán)牙或直傳云服務(wù)器,具有時(shí)間和空間靈活性。操作流程自動(dòng)化、減少誤差:操作人員只需將細(xì)胞樣本注入微流控芯片,樣本即可在包埋有臺(tái)盼藍(lán)染料或AOPI染料的芯片中實(shí)現(xiàn)自動(dòng)染色和混勻,上機(jī)檢測時(shí)系統(tǒng)自動(dòng)對(duì)焦、識(shí)別細(xì)胞,整個(gè)過程減少了人為操作,避免誤差,提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和可靠性。
超高濃度分割:原圖VS識(shí)別圖