黃豆苷元Daidzein 是一種大豆異黃酮，可用作 PPAR 激活劑。

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生物活性

體外研究

在 3T3-L1 脂肪細(xì)胞中，黃豆苷原通過(guò)共培養(yǎng)逆轉(zhuǎn)脂聯(lián)素基因表達(dá)的衰減，并且這些作用被 PPAR-γ 特異性抑制劑抑制。Daidzein 減弱脂肪細(xì)胞中脂聯(lián)素表達(dá)的減少，而 PPAR-γ 特異性抑制劑消除了這種作用。Daidzein 對(duì) PPAR-α 和-γ 的直接激活通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因測(cè)定得到證實(shí)。在 HEK293T 細(xì)胞中，Daidzein 以濃度依賴性方式顯著增加 PPAR-α 轉(zhuǎn)錄活性。盡管在 PPAR-γ 轉(zhuǎn)錄活性中沒(méi)有觀察到明顯的劑量依賴性，但 Daidzein 在 Daidzein 增強(qiáng) PPAR-α 轉(zhuǎn)錄活性的相似濃度范圍內(nèi)也顯著增加 PPAR-γ 轉(zhuǎn)錄活性，最大增加量為 25 μM[1]。Daidzein 是一種大豆異黃酮，可上調(diào) Abcg1 的表達(dá)，并通過(guò)雌激素受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)促進(jìn)培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元的軸突生長(zhǎng)。黃豆苷元Daidzein 是大豆的主要成分，其結(jié)構(gòu)與雌激素相似。它發(fā)揮抗炎作用，降低脂質(zhì)水平，并增加線粒體生物合成。作為核受體過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體 (PPAR) 的激活劑，黃豆苷元可增強(qiáng) PPAR 依賴性基因的轉(zhuǎn)錄，包括肝 X 受體 (小鼠中的 LXR、Nr1h 基因家族)。與 5 至 100 μM 不同濃度的 Daidzein 一起孵育可提高 APOE 轉(zhuǎn)錄活性[2]。

體內(nèi)研究

用黃豆苷原Daidzein 處理 Apoe KO 小鼠在中風(fēng)后 1 個(gè)月增加 Lxr 和 Abca1 基因表達(dá)，表明 ApoE 的缺失不會(huì)干擾其他膽固醇穩(wěn)態(tài)遺傳程序。因此，研究結(jié)果表明，Daidzein 誘導(dǎo)的 ApoE 上調(diào)是促進(jìn)慢性中風(fēng)患者功能恢復(fù)的關(guān)鍵因素[2]。

實(shí)驗(yàn)參考方法

細(xì)胞測(cè)定

HEK293T細(xì)胞以約2.5×10^4個(gè)細(xì)胞/孔的密度接種于24孔板中，培養(yǎng)至70-80%融合。然后，細(xì)胞被瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PPAR-α或PPAR-γ表達(dá)質(zhì)粒，以及一個(gè)在三個(gè)串聯(lián)PPAR反應(yīng)元件（PPRE × 3 TK-luciferase）控制下的熒光素酶基因質(zhì)粒，使用X-treme GENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑。共轉(zhuǎn)染Renilla熒光素酶對(duì)照載體，以控制轉(zhuǎn)染效率。轉(zhuǎn)染后，細(xì)胞在含有DMSO或不同濃度（6.25, 12.5, 25 μM）大豆苷的培養(yǎng)基中再培養(yǎng)24小時(shí)。細(xì)胞被裂解，測(cè)量熒光素酶活性，并以倍增表示，即歸一化為Renilla熒光素酶對(duì)照質(zhì)粒的活性。 產(chǎn)品推薦：Rosiglitazone是PPARY受體激動(dòng)劑

MCE尚未獨(dú)立確認(rèn)這些方法的準(zhǔn)確性，僅供參考。

動(dòng)物給藥

小鼠實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)在10至11周齡的雄性C57（C57 bl/6）和Apoe KO（C57背景）小鼠中進(jìn)行。為了長(zhǎng)期中風(fēng)恢復(fù)，小鼠接受莫西沙星（100 mg/kg）治療3天。預(yù)防性抗生素治療已被證明能有效減少動(dòng)物模型中風(fēng)的死亡率，通過(guò)減輕外周感染。此外，每天皮下注射生理鹽水，并給予水凝膠（Clear H2O）以防止脫水。在急性期（<1周）實(shí)施中風(fēng)后的護(hù)理（抗生素方案、補(bǔ)液以及喂食軟飲料的水凝膠）后，小鼠在第5天開始恢復(fù)體重，并繼續(xù)從中風(fēng)中恢復(fù)。動(dòng)物隨機(jī)選擇進(jìn)行載體或大豆苷治療。在確認(rèn)血流再灌注后，在再灌注后的30分鐘內(nèi)皮下注射載體或大豆苷（10 mg/kg），每天一次，持續(xù)7天，然后每隔一天一次，直到1個(gè)月。

MCE尚未獨(dú)立確認(rèn)這些方法的準(zhǔn)確性，僅供參考。

參考文獻(xiàn)

[1]. Sakamoto Y1, et al. The Dietary Isoflavone Daidzein Reduces Expression of Pro-Inflammatory Genes through PPARα/γ and JNK Pathways in Adipocyte and Macrophage Co-Cultures. PLoS One. 2016 Feb 22;11(2):e0149676.

[2]. Kim E, et al. Daidzein Augments Cholesterol Homeostasis via ApoE to Promote Functional Recovery in Chronic Stroke. J Neurosci. 2015 Nov 11;35(45):15113-26.