哈格里夫斯測試,首創(chuàng)于1988年,是一種精確量化小鼠與大鼠后爪在遭受輻射或紅外熱刺激后熱閾值變化的科學方法,專注于評估這些嚙齒類動物的熱痛感知能力。該測試廣泛應用于探究神經(jīng)損傷修復過程中的疼痛敏感度變化及熱痛反應恢復情況的實驗研究中。痛覺過敏,即疼痛刺激敏感性增強的狀態(tài),是這些研究中的一個關鍵考量因素。多種臨床驗證藥物,如阿片類藥物和GABA受體激動劑,已被證實在延遲熱刺激下爪子敏感性發(fā)作方面具有顯著效果。特別是,足底注射角叉菜膠常被用來建立大鼠后爪的痛覺過敏模型,以評估如嗎啡等藥物對熱痛覺過敏的干預效果。
實驗過程中,有害熱刺激通過特制玻璃裝置聚焦于后爪足底,直至動物因不適而撤回爪子。這一過程由高精度計時系統(tǒng)自動記錄,精確至0.1秒,且設有20秒的安全截止時間,以防止組織受損。
實驗操作流程概述如下:
環(huán)境準備:選擇并準備一間安靜、無干擾的房間作為行為評估區(qū),確保外界噪音與振動等不會引發(fā)動物焦慮,影響實驗結果。
動物適應:先將動物從飼養(yǎng)環(huán)境轉移至測試室,置于各自的圍欄隔間內(nèi),給予30至60分鐘的適應時間,期間可放置蔗糖或食物顆粒輔助其放松。
重復適應:連續(xù)兩天重復上述適應步驟,確保動物對測試環(huán)境充分習慣。
基線測量:在正式測試前,進行基線讀數(shù)采集,讓動物在圍欄內(nèi)再次適應15至20分鐘,以便實驗者根據(jù)具體實驗條件及動物品種優(yōu)化測試流程。
測試準備:調整紅外刺激強度,并將紅外發(fā)射與探測裝置精確對準被測試爪子的足底中心下方,利用容器上的引導線確保定位準確。
觀察記錄:密切觀察動物反應,直至其因熱刺激而自然撤回爪子。需注意區(qū)分自愿移動與熱刺激引起的退縮反應,后者常伴有舔爪行為。
數(shù)據(jù)記錄:一旦檢測到爪子移動,立即記錄反應時間。若20秒內(nèi)無反應,則終止測試以防燙傷。
重復測試:為確保結果的可靠性,至少重復測試三次,并計算平均反應時間。
后續(xù)處理:測試結束后,溫柔地將動物送回飼養(yǎng)室,同時徹底清潔測試設備,為下一次使用做好準備。