探索生物研究新視野:高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)詳解與器材應(yīng)用
瀏覽次數(shù):1362 發(fā)布日期:2024-6-25
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一、實(shí)驗(yàn)原理闡述
高架十字迷宮實(shí)驗(yàn),旨在評(píng)估嚙齒類動(dòng)物在面對(duì)焦慮情境時(shí)的反應(yīng)。與通過傷害性刺激(如電刺激、噪聲刺激、飲食剝奪等)來檢測(cè)小鼠焦慮行為的方法相比,本實(shí)驗(yàn)具有操作簡(jiǎn)便的顯著優(yōu)勢(shì),并能直接觀測(cè)到小鼠的條件性反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)裝置由兩條開臂和兩條閉臂組成,呈十字交叉形狀,中央?yún)^(qū)域懸空于地面之上。基于小鼠的好奇心和嗜暗性,當(dāng)它們面對(duì)開臂時(shí)會(huì)產(chǎn)生探究欲望,但同時(shí)由于其天性喜好暗處(閉臂),這種沖突會(huì)導(dǎo)致它們產(chǎn)生焦慮情緒。
二、實(shí)驗(yàn)操作流程
- 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:確保高架十字迷宮清潔,并將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物提前運(yùn)至行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室的專用臨時(shí)籠架中,適應(yīng)環(huán)境至少3小時(shí),以減少其緊張感。
- 實(shí)驗(yàn)操作:從飼養(yǎng)籠中取出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,使其背向?qū)嶒?yàn)員,輕輕置于迷宮中央?yún)^(qū)域,面向開臂,隨后實(shí)驗(yàn)員迅速安靜地離開。
- 數(shù)據(jù)記錄:?jiǎn)?dòng)SuperMaze或VisuTrack動(dòng)物行為分析軟件,追蹤動(dòng)物在迷宮內(nèi)的運(yùn)動(dòng)軌跡,自動(dòng)計(jì)算相關(guān)指標(biāo),通常實(shí)驗(yàn)持續(xù)5分鐘。
- 實(shí)驗(yàn)后處理:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,將動(dòng)物放回飼養(yǎng)籠,并標(biāo)記實(shí)驗(yàn)信息。同時(shí),使用酒精和紙巾清潔迷宮。
三、實(shí)驗(yàn)觀察指標(biāo)
- 開放臂進(jìn)入次數(shù):記錄動(dòng)物四肢全部或身體80%進(jìn)入任一開放臂的次數(shù)。
- 開放臂活動(dòng)時(shí)間:記錄動(dòng)物在開放臂內(nèi)停留的持續(xù)時(shí)間。
- 閉臂進(jìn)入次數(shù):記錄動(dòng)物四肢全部或身體80%進(jìn)入任一閉臂的次數(shù)。
- 閉臂活動(dòng)時(shí)間:記錄動(dòng)物在閉臂內(nèi)停留的持續(xù)時(shí)間。
- 閉臂后腿直立次數(shù):記錄動(dòng)物在閉臂中,以后腿支撐身體直立的次數(shù)。
- 中央?yún)^(qū)域活動(dòng):記錄動(dòng)物在開臂與閉臂交叉的中央?yún)^(qū)域內(nèi)的活動(dòng)路程和滯留時(shí)間。
四、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
- 實(shí)驗(yàn)開始時(shí),實(shí)驗(yàn)者需確保小鼠背對(duì)實(shí)驗(yàn)者并放置在開臂與閉臂的接合處,且面向開臂。若小鼠面向閉臂,將嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
- 小鼠的年齡、性別、營(yíng)養(yǎng)及健康狀態(tài)應(yīng)基本保持一致,以排除這些因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。
- 迷宮宮體距離地面的高度需根據(jù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的大小來確定,過高或過低均不適宜。
- 迷宮底部可鋪設(shè)白色或黑色的吸水紙,以提高實(shí)驗(yàn)效率和除味效果。
- 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)提前至少3小時(shí)放置在實(shí)驗(yàn)室中適應(yīng)環(huán)境,以減少其對(duì)新環(huán)境的不安情緒。