Oclacitinib是一種新型JAK抑制劑。Oclacitinib抑制JAK1最有效，IC50為10 nM。

 

 

 

 

　　體外研究

 

　　使用分離的酶系統(tǒng)和體外人或犬細(xì)胞模型，確定了Oclacitinib對JAK家族成員和細(xì)胞因子的效力和選擇性，這些細(xì)胞因子在細(xì)胞中觸發(fā)JAK活化。在分離酶系統(tǒng)中測定了奧克拉替尼對JAK家族成員的抑制活性。Oclacitinib分別在10、18、99和84 nM濃度(IC50’s)下抑制JAK1、JAK2、JAK3和TYK2，抑制效果為50%。Oclacitinib對JAK1酶最有效，對JAK1與JAK2的選擇性為1.8倍，對JAK1與JAK3的選擇性為9.9倍。Oclacitinib對JAK家族成員在10~99 nM濃度下的抑制率為50%，對38種非JAK激酶(IC50>1000 nM)無抑制作用。Oclacitinib還抑制jak1依賴性細(xì)胞因子的功能，這些細(xì)胞因子參與過敏和炎癥(IL-2,IL-4,IL-6和IL-13)以及瘙癢(IL-31)，IC50范圍為36至249 nM。奧克拉替尼對細(xì)胞中不激活JAK1酶的細(xì)胞因子(促紅細(xì)胞生成素、粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞集落刺激因子、IL-12、IL-23;IC50>1000 nM)。局部應(yīng)用Tofacitinib(0.1%)和Oclacitinib(0.1%)可顯著降低小鼠耳部外植體的細(xì)胞遷移量(P<0.05)。與各JAK抑制劑處理的表皮相比，載體處理的MHC II類陽性細(xì)胞(即朗格漢斯細(xì)胞)的細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低(P<0.01)。

 

　　體內(nèi)研究

 

　　高劑量奧克拉替尼組大鼠抓癢次數(shù)明顯少于單藥組(P<0.01)�？蛻魮碛械墓�(n=436)患有中度至重度業(yè)主評估的瘙癢和推定診斷為過敏性皮炎。狗隨機(jī)服用奧克拉替尼，劑量為0.4-0.6 mg/kg，每天口服兩次，或服用與賦形劑匹配的安慰劑。采用增強(qiáng)型10 cm視覺模擬評分(VAS)評估第0~7天瘙癢的嚴(yán)重程度，第0~7天皮炎的嚴(yán)重程度。狗可以繼續(xù)研究28天。奧克拉替尼在24小時(shí)內(nèi)迅速起效。

 

 

 

　　重組人JAK1、JAK2、JAK3和TYK2活性激酶結(jié)構(gòu)域用于分離酶分析，使用Caliper微流體技術(shù)確定Oclacitinib對JAK家族成員的效價(jià)。與犬JAK酶相似序列的同源性分別為98、98、100和90%。使用他們的SelectScreen激酶分析服務(wù)，進(jìn)行了Invitrogen kinase panel測試，以確定Oclacitinib對38種不同的非jak激酶的效力。Oclacitinib在濃度為1μM時(shí)進(jìn)行評價(jià)。推薦閱讀：NSI-189神經(jīng)源性化合物

 

 

　　小鼠

 

　　使用的是BALB/cAnN（雌性，6周大）。JAK抑制劑（托法替尼或奧克拉替尼）在甲苯二異氰酸酯(TDI)挑戰(zhàn)前30分鐘以及之后4小時(shí)通過口服或局部應(yīng)用，這是因?yàn)橥蟹ㄌ婺岷蛫W克拉替尼的吸收速度快，在口服或靜脈注射后約1小時(shí)，兩者的血漿濃度均達(dá)到峰值。托法替尼和奧克拉替尼在給藥后的半衰期分別為2小時(shí)和4小時(shí)。每種藥物都在0.5%的甲基纖維素/0.25%的Tween 20溶液中稀釋以備口服，以及在7:1的丙酮:DMSO溶液中稀釋以備局部應(yīng)用，濃度如下描述。對于每一種藥物，設(shè)有一個(gè)只有載體的對照組以及低劑量組和高劑量組。口服劑量如下：托法替尼，10和30mg/kg；奧克拉替尼，30和45mg/kg。局部給藥的劑量對于兩種化學(xué)品都是0.1%，0.25%和0.5%。這個(gè)研究中選擇的托法替尼和奧克拉替尼的口服劑量。

 

　　狗

 

　　狗被隨機(jī)分配到兩個(gè)治療組（即奧克拉替尼或安慰劑）中的一個(gè)，比例為1:1。奧克拉替尼治療組的狗每天兩次口服奧克拉替尼馬來酸片，劑量為0.4-0.6 mg/kg。這些帶刻度的藥片有三種強(qiáng)度，含有3.6、5.4和16 mg的奧克拉替尼。安慰劑治療組的狗被給予相同數(shù)量的藥片，其外觀與奧克拉替尼馬來酸片相同，含有所有相同的輔料，除了奧克拉替尼馬來酸